En el desarrollo farmacéutico, una "prueba de disolución" se refiere a una prueba realizada en un tubo de ensayo para examinar cómo se comporta un medicamento en el cuerpo.
Por ejemplo, incluso si los ingredientes activos son los mismos en los medicamentos genéricos, la formulación puede cambiar dependiendo de los aditivos, el método de fabricación, etc. En tales casos, es necesario medir la tasa de disolución (el porcentaje del ingrediente activo disuelto) a intervalos regulares y comparar la formulación antes y después del cambio para demostrar que las tendencias de disolución son similares.
El gráfico a continuación muestra una curva de disolución , donde el eje horizontal representa el tiempo (minutos) y el eje vertical la velocidad de disolución. Utilizando pH 4,5, pH 6,0 o agua como solución de prueba, las velocidades de disolución de los productos de prueba y de referencia se representan en función del tiempo y se conectan mediante una línea discontinua.
*Los puntos trazados en el eje Y son las tasas de disolución promedio de múltiples formulaciones de muestra.
Al comparar las dos curvas de las tres soluciones de prueba, la tasa de disolución aumenta con el tiempo y se acerca al 100 %, mostrando un comportamiento similar. Sin embargo, las dos curvas no se superponen completamente y, en ocasiones, se observan diferencias.
Además, la curva del agua parece más similar en comparación con las curvas de pH 4,5 y pH 6,0.
Hasta este punto, hemos visto cómo interpretar la similitud al observar gráficos, pero se han propuesto varios indicadores para determinar objetivamente la similitud de múltiples curvas de disolución .
En este artículo, presentaremos un método que utiliza una función llamada f2 , que se utiliza ampliamente como criterio de juicio, y cómo calcular su valor en JMP.
Además del valor f₂, JMP también puede calcular el intervalo de confianza para f₂. En lugar de juzgar la similitud basándose en el valor estimado, se puede determinar la similitud considerando la incertidumbre, comprobando si el límite inferior del intervalo de confianza calculado es superior al valor de referencia (=50) .
Análisis F2
En el análisis F2, el valor de f2 se calcula utilizando la siguiente fórmula a partir de los valores de la tasa de disolución del grupo de formulación de prueba y del grupo de formulación de referencia en cada punto de tiempo.
En la fórmula, R_t^hat y T_t^hat representan las tasas de disolución promedio del grupo de formulación de prueba y del grupo de formulación de referencia en el tiempo t, respectivamente.
Cuanto mayor sea el valor de f² calculado con esta fórmula, más similares serán los perfiles de disolución. Si la diferencia en la velocidad de disolución en todos los puntos de comparación es 0 (cero), el denominador del logaritmo será 1 y la parte logarítmica del lado derecho será 2; por lo tanto, el valor de f² será 100 (= 50 x 2).
Un estándar para determinar la similitud es f2 = 50 , y JMP también utiliza este valor como estándar.
Sin embargo, se requiere precaución ya que las "Directrices para pruebas de bioequivalencia para cambios de formulación en formas farmacéuticas sólidas orales" y las "Directrices para pruebas de bioequivalencia para medicamentos genéricos" establecen que los criterios para determinar f2 difieren según el período de tiempo y en qué medida se disuelve la formulación de referencia.
En JMP
Para calcular el valor f2 en JMP, utilice las opciones de la plataforma de Ajuste de Curvas . Aquí explicaremos cómo hacerlo en JMP con un ejemplo.
Las curvas de disolución de la formulación de prueba y la formulación estándar se comparan calculando el valor f2 para cada tipo de solución de prueba (pH 4,5, pH 6,0, agua).
El gráfico de la curva de disolución que se muestra al principio se creó a partir de los siguientes datos. Se utilizaron seis formulaciones (recipientes) para cada tipo de solución de prueba (pH 4,5, pH 6,0, agua) y formulación (prueba, referencia), y las velocidades de disolución se midieron a los 0, 5, 10, 15, ..., 240 y 360 minutos.
| Nombres de columnas |
significado |
| pH/Agua |
Tipo de solución de prueba (pH 4,5, pH 6,0, Agua) |
| Droga |
Tipo de formulación (Prueba: formulación de prueba, Referencia: formulación estándar) |
| Muestra de tableta |
Número de muestra de formulación (1-6) |
| Minutos |
Horas (minutos) |
| % Liberar |
Tasa de disolución (%) |
*Estos datos de muestra se pueden descargar de este blog (DissolutionData_Stacked.jmp).
funcionar
1. Seleccione Analizar > Modelos avanzados > Ajustar curva y especifique las columnas de la siguiente manera: para Agrupar por, especifique la columna que identifica el objetivo de comparación de las curvas (en este ejemplo, "Fármaco"), y para Por, especifique la columna que identifica la solución de prueba (en este ejemplo, "pH/Agua"), ya que el análisis se realiza para cada solución de prueba.
2. Se mostrará un informe para cada nivel de la variable "Por". Seleccione la opción "Análisis F2 " en el botón triangular rojo junto a "Ajuste de curva" en la esquina superior izquierda del informe.
3. En la ventana "Estimación de la curva de disolución" que aparece, especifique la columna que identifica la formulación individual (recipiente) (en este ejemplo, "Muestra de tableta") y el grupo de medicamentos estándar (en este ejemplo, "Referencia").
Al realizar los pasos anteriores, se mostrará el informe "Análisis F2" de cada solución de prueba.
Informe de análisis F2
■ En el caso de "pH 4,5"
El informe muestra las curvas de disolución para cada grupo y las estadísticas dependientes del tiempo (media, desviación estándar, coeficiente de variación (CV)).
Las áreas resaltadas en amarillo cumplen los siguientes criterios:
- Hay dos o más puntos de tiempo en el grupo de prueba donde la disolución promedio es mayor al 85%.
- El valor del CV en el primer punto temporal en el grupo de estudio es superior al 20%.
- Hay puntos de tiempo después del primer punto de tiempo en el grupo de prueba donde el valor de CV supera el 10%.
Debajo de este informe, se muestra un informe sobre el valor f₂. El "F₂ observado" (=45,081) es el valor f₂ calculado mediante la fórmula de la sección anterior. La distribución bootstrap de f₂ se obtuvo remuestreando la formulación mediante el método bootstrap, y los límites inferior y superior del intervalo de confianza del 90 % se calcularon mediante el método BCa (un método de corrección de sesgo).
En este ejemplo, el valor estimado de f2 es 45.081, con un intervalo de confianza del 90% de [43.638, 46.509].
JMP utiliza f² = 50 como estándar, y si el límite inferior del intervalo de confianza del 90 % es mayor que 50, determinará que f² es mayor que 50, incluso considerando la variabilidad . En este ejemplo, el límite inferior es 43,638, que es inferior a 50, por lo que podemos concluir que las dos curvas no son similares.
■ En el caso de "pH 6.0"
El valor estimado de f2 es 50,208, con un intervalo de confianza del 90% de [48,103, 52,293].
La estimación de f2 es ligeramente superior a 50, pero el límite inferior del intervalo de confianza es inferior a 50, por lo que no es comparable considerando la incertidumbre. El límite inferior del intervalo de confianza es 48,103, que no supera 50.
■ En el caso del “Agua”
Al observar las curvas de disolución, las de las formulaciones de prueba y de referencia parecen más similares que las de pH 4,5 y pH 6,0. El valor estimado de f² es 55,096 con un intervalo de confianza del 90 % de [51,316; 60,548].
Dado que el límite inferior del intervalo de confianza del 90% es mayor que 50, podemos concluir que las dos curvas son similares en este caso.
Los resultados del análisis F2 hasta el momento se resumen en el gráfico a continuación. La línea punteada en el eje vertical se dibuja donde el valor F2 es 50. Como se puede observar en este gráfico, solo el agua tiene un límite inferior del intervalo de confianza del 90 % superior a 50.
Otros métodos de comparación
El análisis F2 presentado hasta ahora es un método no paramétrico que no asume una curva específica. Existen otros métodos para comparar curvas de disolución además del análisis F2, y JMP incluye el análisis F1, la distancia multivariante y los métodos T2EQ.
De estos, T2EQ es un método que utiliza la estadística T2, que mide la diferencia en la tasa de disolución en múltiples puntos de tiempo, para probar si esa diferencia está dentro del rango de equivalencia (EQ).En lugar de utilizar intervalos de confianza para determinar la similitud, T2EQ calcula un valor p para la estadística de prueba y, si este valor p es menor que el nivel de significancia especificado, la formulación de prueba se considera similar a la tableta de referencia.
En este ejemplo, si aplicamos T2EQ al agua, el valor p es 1, lo que no sugiere que las dos curvas sean similares, lo cual es diferente de la conclusión del análisis F2.
por Naohiro Masukawa (JMP Japón)
Naohiro Masukawa - Comunidad de usuarios de JMP
