| 揚聲器 |
文字稿 |
| Jason Wiggins,JMP |
嘿,麥迪遜。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
對不起,我當時太慌張了。 |
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我當時以為是我的錯,心想:糟了。 |
| Jason Wiggins,JMP |
不,這太搞笑了,要設定這些東西,需要準備大約 20 件不同的事情,而且必須全部做對。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
為了我們所做的一切。 |
| Jason Wiggins,JMP |
你知道,步驟越多,助手越多,選擇就越多,但也越容易搞砸。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
是的。 |
| Jason Wiggins,JMP |
嗯,總之,我覺得我們應該沒事了,我懂了。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
完美的。 |
| Jason Wiggins,JMP |
是的,看起來沒有任何奇怪的相機瑕疵。 |
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我想說,如果能調暗背景燈光就好了,但… |
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正是如此。 |
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哦,我知道是怎麼回事了。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
是不是太暗了? |
| Jason Wiggins,JMP |
不,我覺得這樣挺好的。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
好的。 |
| Jason Wiggins,JMP |
這樣好多了,這樣好多了。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
所以,現在陽光明媚,我把上面的燈關掉了。 |
| Jason Wiggins,JMP |
您是從辦公室登入的嗎? |
| 麥迪遜·亨布里 |
是的,我在辦公室簽的字,我盡量這麼做了,但是現在在家工作的人太多了。 |
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是的,當時,就像每個人都在同一時間開會一樣,我就想,那我就用我們現在所在的這個會議室吧。 |
| Jason Wiggins,JMP |
好了,一切就緒。在我們開始之前,我的任務之一是提醒大家,這段錄音將會發佈在社群發現頁面上,你們同意嗎? |
| 麥迪遜·亨布里 |
是的,我的所有材料都已獲得法務團隊的批准,非常完美。 |
| Jason Wiggins,JMP |
太好了,我剛剛注意到我們其實正在錄音,但我們的對話會被剪掉。 |
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好了,你隨時都可以出發。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
好的,那我打開看看。 |
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打開了。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
模式。 |
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李OK。 |
| Jason Wiggins,JMP |
好的,我看到你的螢幕了,你已經起床了。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
做得過火了,你看到了嗎?或者說,那些臉孔是不是模糊了我的臉,導致簡報中出現灰色方塊? |
| Jason Wiggins,JMP |
我這邊看起來好像不是這樣。 |
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而且我很確定,如果人們觀看影片的話,他們就會看到這些內容。 |
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你懷孕了,我看到了。 |
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你的海報。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
好的。 |
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讓我一步一步來。 |
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所以我就… |
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有了。 |
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好的,那我先做個簡單的自我介紹,然後開始我的演講。 |
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我覺得那樣挺好。 |
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好的。 |
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好的。 |
| 麥迪遜·亨布里 |
大家好,我叫Madisun Hembree,是賽默飛世爾科技公司的產品開發工程師,在遺傳科學部門工作。 |
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今天我將講解如何使用 JMP 預測分析器來評估玉米樣本中 SNP 檢測等位基因區分的最佳方法。首先,我先簡單介紹一下, |
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當我確定我的檢測性能時,或者你想想,實際上任何系統的任何性能,都需要定義兩種類型的變數。 |
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首先是你的關鍵因素變數。這些是你要改變的變量,你要測試不同的條件。 |
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就我而言,我將測試不同的 SNP 檢測類型,這些類型尋找不同的基因,並在多種不同的玉米籽粒類型上運行它們。 |
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第二類變數是輸出變數。這些變數將用於衡量關鍵因素變數的哪些組合。 |
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這些優化措施是根據您使用者定義的需求而製定的。就我而言,我將測量數據的呼叫率、簇擴展度和簇到 NTC 的距離,這些指標是: |
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下一節我會更詳細地解釋這些指標的意義。所以,這張海報將展示我用來建立基準線的基準實驗。 |
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此檢測方法對我的起始原料的效能影響很大。由於我有幾種不同類型的輸出變量,它們的權重略有不同,因此很難手動完成。所以,使用 JMP 預測分析器,您可以進行設定。 |
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一個能夠考慮用戶自訂需求的吸引力函數,可以幫助您根據材料,透過數學方法建立吸引力排名。 JMP 軟體在這方面將對我們大有幫助。 |
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接下來,我們來簡單談談什麼是SNP檢測。 |
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我們體內有DNA;它包含了我們所有的遺傳訊息。 |
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最常見的遺傳變異形式是單核苷酸多態性(SNP)。 SNP 指的是單一核苷酸片段(即 DNA 中的一個核苷酸)的變異。 |
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被換掉了。當我們進行SNP檢測時,我們是為了進行基因分型。 |
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我們的樣本。當您查看這些數據時,您會看到類似於右側所示的圖表,即等位基因鑑別圖。因此,我們能夠將這些樣本進行基因分型,分成不同的類別。 |
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這對於我們能否從樣本中獲取所需資訊至關重要。因此,在我的實驗中,我希望能夠確定關鍵因素變數的不同組合會為我帶來什麼。 |
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繪製最佳判別圖。為此,我將使用三個關鍵指標。第一個是呼叫率。 |
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因此,基因型檢出率是指每個通過的 SNP 中成功檢出基因型的百分比。 |
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為此,我希望這個百分比非常高,所以我希望最大化這個百分比,我希望我們當中大約 80% 到 100% 的人能夠成功地對我們的樣本進行基因分型。 |
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其次,我要講解的是聚集性疫情的擴散,也就是我們在這裡看到的紅色區域。 |
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這裡。這是每個數據點到其所在簇中心距離的標準差。我們需要這個數值。 |
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盡量減少。我們希望這個數字非常小,這樣我們才能區分出你在紅色、綠色和藍色中看到的不同群體。 |
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越小,我們就越容易區分它們,並成功地對我們的樣本進行基因分型。 |
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最後,是聚類到 NTC 的距離。這是聚類中所有數據點到 NTC(即我們的無模板對照組)的平均距離。 |
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所以我們希望確保我們的基因型簇與沒有樣本的對照組保持距離,但在一定範圍內,該簇與對照組的距離越遠, |
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增加的益處並不多,因此這種距離的吸引力並非線性關係。而JMP能夠做到的是… |
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權衡每個變數的重要性。在決定組合方案的優劣時,我們希望呼叫率和簇間距比簇到 NTC 的距離更重要。簇到 NTC 的距離仍然重要,但不如其他兩個變數重要。 |
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所以,回到正題,我做了實驗。我用SNP檢測方法檢測了所有不同的玉米粒。我運行了這些檢測。 |
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在PCR反應中,我提取了相關數據,並根據這些數據手動計算了檢出率、簇擴散率和簇到NTC的距離。 |
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在我的關鍵因素變數的所有不同組合中,我將向大家展示…我將其輸入到 JMP 表格中,並將向大家示範如何使用預測分析器產生期望函數。 |
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所以,正如你在這裡看到的,我在這裡有兩個關鍵因素變量,以及所有的輸出變數。接下來,我要做的就是點擊“分析”,然後點擊“擬合模型”。 |
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接下來,我可以把所有輸出變數放到 Y 類別中,然後把所有關鍵因素變數加入模型效應。因為我只對預測分析器感興趣,所以我會盡量減少報告數量,這樣就不會看到太多圖表了。 |
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執行此程式時,開啟預測分析器,進入最小二乘擬合,然後點擊分析器以填滿底部的內容。 |
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所以,這裡只是把我們所有的結果繪製成圖表。您會在 Y 軸上看到所有輸出變量,在下方看到所有關鍵因素變數。下一步,我們要設定期望函數。 |
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為此,我們需要進入「最佳化」和「期望值」選項,您會看到 JMP 會自動在右側填入這些期望值曲線。因此,JMP 會自動將這些值全部設為最大化,您會看到這樣的期望值。 |
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下面有點像是映射關係。所以,你需要做的就是根據我們定義的需求來設定這些參數。首先我們討論了通話費率。 |
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就像我之前說的,我想盡可能提高這個指標。我真的希望它的受歡迎程度能達到80%到100%。 |
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你會看到我把最高設定調得非常誘人。誘人度介於0到1之間,所以我希望100%是最誘人的。 |
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我將中間值設為 80%,並且我希望保持這個值不變,這樣當它低於 80% 時,它就… |
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更不受歡迎。這種受歡迎程度曲線不會是線性關係。我們希望它保持在 80 到 100% 之間。 |
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100%。我先把這個重要性設為 1,稍後我們再看看具體該怎麼做。 |
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接下來是我們的聚集性傳播。我們之前討論過,我們真的想盡可能減少這種傳播,而現在的情況是… |
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左邊的數字代表的是我實驗數據中的數值範圍。所以我接下來要… |
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稍微調整一下,讓它們從零到二更合理一些。而且,因為我只想盡量減少這種影響,所以我會保持這條期望曲線相當線性的關係。 |
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所以我打算把它設定得非常理想,盡可能接近零,數值越小越好,而且優先順序要低一些。我會讓它保持與呼叫率相同的優先順序。 |
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最後一個,就是我們之前討論過的星系團到NTC的距離。這將是… |
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我們想要最大化。我們設定的距離範圍是 0 到 12,這是根據我們數據得出的,然後我想進去設定一些參數。 |
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期望值,比如說我希望它在接近 12 的時候是理想的。當它接近 6 的時候,它的吸引力會稍微降低一些,但不會降低太多。 |
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當我們向下移動時,稍微減少一些,但最重要的是,我要重視這一點,我要減少它。 |
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所以我打算把它改成0.5,這將改變期望值計算的方式,以及它所佔的權重。 |
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您可以看到,這裡已經繪製了期望值曲線,您可以看到其中一些是線性關係,一些是曲線關係。 |
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我們想要確保達到最高的吸引力,因為當我們做到這一點時,你會看到下面每個玉米粒都會顯示一個吸引力數值。現在它顯示的是我的玉米粒3, |
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我的玉米11 SNP檢測能提供最理想的設定。所以你可以保存這個公式,這樣我們就可以查看一下。 |
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我需要查看這個公式,了解它的計算方式,這樣我就可以用它來排序。排序時,需要彈出一個新的資料表。點擊“繼續”按鈕即可彈出該資料表。 |
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一旦彈出該窗口,你會看到一個列表,當我滾動滑鼠移到列表上時,你就會看到“受歡迎程度”數字。 |
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以及他們如何從最高到最低進行排名。我們還可以看到這個數字是如何計算出來的。你可以查看公式。 |
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而最重要的是,當我們設定自身的重要性時, |
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您可以看到,在「呼叫率」、「群集價差」和「群集到NTC」這幾個因素下,最突出的那個數值是所有這些因素加起來的結果。而且您可以看到,每個因素都乘以了一個縮放係數。 |
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你會注意到,到 NTC 的群集乘以了 0.2,而其他兩個群集乘以了 0.4。 |
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這意味著,當我計算每種玉米粒類型和SNP檢測類型組合的期望值時,它考慮了基因檢出率和簇分佈。 |
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更高,並且似乎比聚類到 NTC 距離更重要。 |
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所以,當這些資料被填入後,關鍵在於能夠確定在計算這個期望值時,哪個變數的權重比較高。因此,我得到了這個排名清單和這些期望值。 |
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但是,你知道,這些有什麼用呢?所以,這對我來說是一個基線實驗,用來了解我的檢測效能。當我進行任何優化時,例如優化我的反應混合物,或者我想改變SNP檢測中的順序,我想嘗試… |
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或許可以優化一下我的多工母帶混音。 |
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這樣做的時候,我需要了解我想使用哪些材料,因為我不知道那些玉米粒裡會含有哪些基因。 |
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我現在有了這份清單,可以滾動到最底部,找到那些真正不理想的選項。可能有些人攜帶某種基因,但實際上他們根本不攜帶。現在我可以根據這個理想度排名把他們排除掉。 |
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可能有些檢測方法的必要性較低,但我覺得我可以優化我的檢測方法。 |
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為了改進這一點。現在我可以從清單中選擇我以後要使用的材料。但如果手動操作的話,就會很麻煩。 |
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對我來說,這幾乎不可能。我不太清楚如何用數學方法實現,也不知道如何用我的輸出變數來區分高低不同的值。 |
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因此,JMP 很快就給了我一份列表,這樣我就可以開始進行我需要的任何類別的優化過程。 |
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我的海報展示就到這裡。我要感謝我的導師Joyce Wile和Ferrier Le,感謝她們提供材料並給予我持續的支持。希望大家喜歡我的展示。謝謝! |