Ciao, tutti. Grazie Voi per unirsi Mio parlare. I Sono Giulia Leccati, Io sono a Anziano Scienziato A AstraZeneca. I lavoro In biofarmaceutico sviluppo In IL analitico scienza squadra. Oggi, I Volere A parlare a te Di IL utilizzo Di Dipartimento dell'Energia per IL sviluppo Di analitico caratterizzazione metodi, maggior parte particolarmente cromatografia metodi.
In di oggi parlare, Io sono andando A parlare Di terapeutico proteine, Che cosa Essi Sono, E Perché Essi Sono stimolante per analitico test, E introdurre Voi A IL utilizzo Di progetto Di sperimentare per analitico metodo sviluppo E IL applicazione Di Dipartimento dell'Energia per IL sviluppo Di carica varianza metodo, specificamente cationico scambio cromatografia metodo.
A inizio spento, proteina terapeutica Sono intrinsecamente molto complesso dovuto A loro più grande misurare E IL presenza Di il post- traslazionale modifica, E Anche chimico modifiche Quello Potere IL proteina subire Attraverso durante IL processi Di espressione In cellule, purificazione, E magazzinaggio.
Monoclonale anticorpi dominare IL biofarmaceutico mercato, rappresentando Di 70 % Di IL totale saldi Di biofarmaceutico prodotti. Tuttavia, recentemente, Là È a spingere per nuovo prodotti, Prossimo generazione biofarmaceutici, Quale Sono bispecific anticorpi, anticorpo frammento, fusione proteine, E molti altro formati. Tutto Di loro Venire con unico sfide dovuto A loro complesso struttura E presenza Di più alto ordine struttura, glico forme, carica varianti, IL solfato obbligazioni, ossidato deamidato specie, isomerizzazione, aggregazione, frammentazione.
A LL Di questi modifica, chimico processo [inudibile 00:02:37] modifica, Potere impatto SU potenza, sicurezza, qualità Di IL finale farmaco prodotto. Questo È Perché completo analitico caratterizzazione E analitico test per tutto Tutto IL fasi Di prodotto vita ciclo È chiave A Incontrare normativo standard, A Essere abilitato A consegnare a prodotto Quello incontra normativo qualità profilo.
Noi utilizzo a pletora Di analitico tecniche per analizzare proteine, E questi Sono basato soprattutto SU cromatografia metodi, elettroforetico metodi, E [inudibile 00:03:25] . Dovuto A IL intrinseco strutturale complessità Di proteine, analitico metodo sviluppo Potere Essere abbastanza stimolante.
In di oggi parlare, Io sono andando A specificamente parlare Di cromatografia metodi E IL utilizzo Di progetto Di sperimentare A aiuto IL sviluppo Di cromatografia separazione. Cromatografia metodo Potere Essere abbastanza complesso, particolarmente Se Voi Avere a complesso analita Piace a proteina. Questo È Perché IL separazione dipende SU IL interazione Di parecchi variabili come COME mobile fase composizione, respingente pH, fluire valutare, colonna chimica, temperatura, IL tipo Di rivelatore Quello Voi decidere A utilizzo per IL analisi. Tutto Di questi parametri Bisogno A Essere Bene- sintonizzato E controllato durante IL separazione processo In ordine A raggiungere IL desiderato separazione. Dipartimento dell'Energia Potere Essere molto utile contro uno fattore A a tempo approccio.
Uno fattore A a tempo approccio coinvolto IL variazione Di uno parametro A a tempo, mantenimento IL altro costante. Questo Maggio Guida A a grande sperimentale correre, mancanza Di informazioni Perché c'è mancanza Di indagine SU fattori interazioni. Mancanza Di informazioni Anche conduce A aggiuntivo esperimenti durante metodo convalida, Quale Maggio allungare Anche Di più IL metodo sviluppo processo E Finalmente ritardare IL complessivamente prodotto sviluppo.
Dipartimento dell'Energia, In confronto A uno fattore A a tempo approcci, Dipartimento dell'Energia abilita IL variazione Di multiplo parametri A a tempo. Questo permettere, con a ridotto numero Di esperimenti, A investigare a grande numero Di fattori, compreso IL interazioni fra loro. Anche IL sviluppo Di matematico modelli Quello permettere IL valutazione Di rilevanza E IL statistico significato A facilitare Tutto IL passi necessario durante metodo convalida. Dipartimento dell'Energia abilita Veramente A investigare a Largo progetto spazio con meno risorse, COSÌ In a Di più efficiente modo. In fatto, I Piace detto Dipartimento dell'Energia abilita Più veloce, più economico, E più intelligente esperimenti a consegnare più forte E Meglio analitico metodi.
Nel presente parlare, Io sono andando A parlare Voi Attraverso a diviso Dipartimento dell'Energia approccio per IL sviluppo Di a cazione scambio cromatografia metodo. Cazione scambio cromatografia È usato per IL analisi Di carica varianti. Nello specifico, Se Voi Vedere Qui SU IL Sinistra mano lato Di Questo diapositiva, Voi Potere Vedere a cromatogramma Di a proteina Dove Voi Potere Vedere Alcuni acido specie Qui SU IL Sinistra, [inudibile 00:07:17] SU IL Sinistra Di a principale specie picco, E Alcuni di base specie picco.
Tutto questi acido di base specie Potere Essere formato dovuto A IL presenza Di chimico modifica Quello Potere Guida A superficiale carica distribuzione variazione In IL proteina. Cazione scambio cromatografia metodi Sono abbastanza complesso cromatografia metodi Perché IL separazione efficienza È ricercato di a numero Di fattori E abbastanza sensibile A piccolo cambiamenti Di questi fattori come COME colonna chimica, mobile fase pH, temperatura, fluire valutare, contenuto Di sale, tempo Di IL separazione.
In Questo approccio, Io sono andando A parlare Voi Attraverso UN efficiente modo A sviluppare cazione scambio cromatografia metodo usando Dipartimento dell'Energia. Se Voi Sono familiare con Dipartimento dell'Energia, Voi Maggio Sapere Quello Spesso richiede a sequenziale approccio. In Questo sperimentare, I eseguito a principale effetti screening progetto per abilitazione IL selezione Di IL migliore colonna chimica E IL mobile fase pH per IL carica varianza separazione Di questo specifico mAb molecola.
Durante IL secondo Dipartimento dell'Energia, I utilizzo risposta superficie metodologia, particolarmente a centrale composito progetto Dipartimento dell'Energia, A ottimizzare IL cromatografia separazione di cambiare IL fluire valutare E [inudibile 00:09:36] . Andiamo Prendere in Di più dettaglio In IL Primo Dipartimento dell'Energia sperimentare. Questo era a principale effetti screening progetto Dove I schermato quattro colonna chimica comprato di quattro diverso fornitori, Agilent, Sepax, Phenomenex, E Acque e I schermato a allineare Di pH da 5.5 A 6.5.
Mio risposta era IL sperimentale picco capacità, Quale È a parametro Quello racconta Voi IL efficienza Di a cromatografico separazione, precisamente IL numero Di picchi Quello Potere Essere separati entro IL cromatogramma, IL cromatografia tempo Quello Voi impostato. Altro parametri come COME concentrazione Di respingente, concentrazione Di sale a IL inizio Di IL cromatografia pendenza, fluire valutare, pendenza tempo, forma, temperatura, iniezione volume, concentrazione, E IL UV assorbanza erano tenuto costante.
Questi Sono IL risultati per IL Primo Dipartimento dell'Energia. SU IL Sinistra mano lato, Voi Potere Vedere IL quattro diverso colonna risultati. Voi Potere Vedere Come IL sperimentale picco capacità cambiamenti rispetto IL pH modifica In IL mobile fase In Tutto IL quattro diverso colonne. Voi Potere Vedere Quello Noi scopo A Avere alto sperimentale picco capacità valori. Voi Potere Vedere Quello IL Fenomenex colonna eseguito migliore.
In Tutto Di questi tre colonne, Noi Potere Vedere Quello pH Di 6.5 abilita maggiore sperimentale picco capacità. Ma IL Fenomenex colonna consentito per Meglio separazione risultati. Esso È Anche visibile SU IL Giusto mano lato Di Questo diapositiva In IL pannello UN. Voi Potere Vedere A pH 6.5, Come IL separazione differisce Quando usando diverso cromatografia colonne.
Noi Avere Agilent , Acque , Fenomenex , E Sepax . Decisamente, IL separazione Di IL carica varianti usando IL Fenomenex colonna È tanto Meglio di In IL altri Perché questi acido picchi Sono molto BENE separati COME BENE COME questi di base specie Qui da IL principale prodotto picco.
Pannello B, Noi Avere isolato soltanto IL risultati Di IL Fenomenex colonna. Come IL cromatografia separazione era Quello con IL mobile fase O con pH 5.5, 6.0 e 6.5. Noi Potere Vedere Come IL separazione migliora con IL aumento del pH. Ovviamente, IL mobile fase pH È dettato di IL intrinseco molecola pi. Noi Potevo soltanto investigare Questo allineare. Altrimenti, IL molecola volevo Avere combattuto A Trovare suo Proprio colonna.
Basato SU Nostro fondamentale conoscenza Di cromatografia separazione con cazione scambio colonne, Noi deciso Quello Questo parametro, COSÌ Questo Fenomenex colonna E pH Di 6.5, erano ottimale A trasportare SU sviluppo. Noi portato SU con IL secondo Dipartimento dell'Energia usando a centrale composito progetto.
Centrale composito progetto È a tipo Di Dipartimento dell'Energia cadente entro IL ombrello Di risposta superficie metodologia, Quale È usato per ottimizzato condizioni per indagare IL presenza Di curvatura, per esempio, E estrapolare ottimale valori. In Questo caso, Noi utilizzo Nostro Fenomenex colonna E mobile fase pH Di 6.5 e iniziato A giocare con altro parametri come COME respingente concentrazione, concentrazione Di IL sale A IL inizio Di IL pendenza, E fluire valutare A investigare ottimale condizioni.
Centrale composito progetto abilitato A molto in modo efficiente, con a pochi numero Di corre, A identificare ottimale separazione condizioni, ottimale metodo condizioni. In fatto, A IL molto FINE Di IL diviso Dipartimento dell'Energia approccio, Noi Potevo Dire Quello con IL indagine Di quattro colonna, mobile fase, pH allineare, sale composizione, pendenza fluire valutare. Con soltanto 27 sperimentale corre, Noi Potevo ottimizzare a metodo per un monoclonale anticorpo. Questo metodo È molto utile Perché Esso È Ora usato COME a presto, alto capacità di produzione screening sperimentare. In a presto, alto capacità di produzione analitico metodo per screening differenze In IL carica varianza profilo Di questi specifico molecole espresso In diverso condizioni E confrontare Esso A a standard.
Voi Potere Vedere Qui Quello IL blu linea È Nostro riferimento standard E IL rosso linea È a stress materiale Di IL Stesso molecola. Voi Potere Vedere Come IL carica varianza profilo cambiato COME a conseguenza Di IL stress condizione applicato A Questo molecola. Questo era raggiunto Grazie A Questo analitico metodo Quale era sviluppato E ottimizzato con a Dipartimento dell'Energia approccio.
Noi Anche deciso A attrezzo Questo Dipartimento dell'Energia approccio COME a piattaforma flusso di lavoro per analitico metodo sviluppo per nuovo prodotti, nuovo era prodotti farmaceutici e Noi schermato a numero Di prodotti. Per Tutto Di loro, Noi applicato Primo IL Primo principale effetto schermo progetto, E Noi identificato IL migliore colonna E mobile fase pH A utilizzo. In secondo luogo, Noi applicato IL centrale composito progetto A ottimizzare IL separazione.
Ora, Noi Avere identificato a piattaforma colonna E a mobile fase composizione per Questo classe Di terapeutica. Quando nuovo molecole viene in IL conduttura, Noi Potere molto velocemente, Appena di usando a centrale composito progetto, Quale coinvolge In realtà Appena 12 corre, ottimizzare IL cromatografia profilo E consegnare UN ottimale cazione scambio metodo per a specifico prodotto.
IL chiave Prendere- casa messaggi da Mio parlare Oggi È Quello Dipartimento dell'Energia sistema metodo sviluppo seguito di appropriato statistico analisi abilita A piano sperimentare basato SU tempo, costo, E analitico risorse disponibile molto in modo efficiente, E programma IL esecuzione Di esperimenti con adeguato campione tipo E misurare A estrapolare IL massimo quantità Di informazioni da Nostro chimico dati e efficientemente indirizzo IL sfide E obiettivi Di IL destinato ricerca.
Esso decisamente salva tempo E costo per sperimentare esecuzione In confronto A uno fattore A a tempo approcci. Maggior parte particolarmente, Esso consente IL complessità Di analitico metodo sviluppo, Ma Ancora interrogando parecchi fattore A a tempo E studiando IL effetto Di Entrambi individuale metodo parametri E IL interazione SU IL dipendente variabile.
Con di oggi parlare, I Speranza I ispirato Voi A fare domanda a Di più Dipartimento dell'Energia In tuo esperimenti. Grazie Voi molto tanto, tutti, per tuo Attenzione. Se Voi Avere Qualunque domande, Tatto gratuito A portata fuori A Me. Grazie Voi.
