Hallo, alle. Dank Du für Beitritt Mein sprechen. I Bin Julia Leck dich selbst, Ich bin a Senior Wissenschaftler bei AstraZeneca. I arbeiten In Biopharmazeutika Entwicklung In Die analytisch Wissenschaft Team. Heute, I wollen Zu sprechen zu dir um Die verwenden von Damhirschkuh für Die Entwicklung von analytisch Charakterisierung Methoden, am meisten besonders Chromatographie Methoden.
In heutigen sprechen, Ich bin gehen Zu sprechen um therapeutisch Proteine, Was Sie Sind, Und Warum Sie Sind herausfordernd für analytisch Testen, Und einführen Du Zu Die verwenden von Design von Experiment für analytisch Verfahren Entwicklung Und Die Anwendung von Damhirschkuh für Die Entwicklung von Aufladung Varianz Verfahren, speziell Kation Austausch Chromatographie Verfahren.
Zu Start aus, Protein Therapeutika Sind von Natur aus sehr Komplex fällig Zu ihre größer Größe Und Die Gegenwart von die Post- translational Änderung, Und Auch chemisch Änderungen Das dürfen Die Protein unterziehen durch während Die Prozesse von Ausdruck In Zellen, Reinigung, Und Lagerung.
Monoklonal Antikörper dominieren Die Biopharmazeutika Markt, repräsentieren um 70 % von Die gesamt Verkäufe von Biopharmazeutika Produkte. Jedoch, kürzlich, Dort Ist a drücken für neu Produkte, nächste Generation Biopharmazeutika, welche Sind bispezifisch Antikörper, Antikörper Fragment, Fusion Proteine, Und viele andere Formate. Alle von ihnen kommen mit einzigartig Herausforderungen fällig Zu ihre Komplex Struktur Und Gegenwart von höher Befehl Struktur, Glyko Formulare, Aufladung Varianten, Die Sulfat Anleihen, oxidiert desamidiert Spezies, Isomerisierung, Aggregation, Zersplitterung.
A ll von diese Änderung, chemisch Verfahren [unverständlich 00:02:37] Änderung, dürfen Auswirkungen An Potenz, Sicherheit, Qualität von Die Finale Arzneimittel Produkt. Das Ist Warum gründlich analytisch Charakterisierung Und analytisch Testen hindurch alle Die Stufen von Produkt Leben Zyklus Ist Schlüssel Zu treffen regulatorisch Normen, Zu Sei ermöglicht Zu liefern a Produkt Das trifft regulatorisch Qualität Profil.
Wir verwenden a Fülle von analytisch Techniken für Analyse Proteine, Und diese Sind basierend meistens An Chromatographie Methoden, elektrophoretisch Methoden, Und [unverständlich 00:03:25] . Fällig Zu Die inhärent strukturell Komplexität von Proteine, analytisch Verfahren Entwicklung dürfen Sei ganz herausfordernd.
In heutigen sprechen, Ich bin gehen Zu speziell sprechen um Chromatographie Methoden Und Die verwenden von Design von Experiment Zu helfen Die Entwicklung von Chromatographie Trennung. Chromatographie Verfahren dürfen Sei ganz Komplex, besonders Wenn Du haben a Komplex Analyt wie a Protein. Das Ist Weil Die Trennung kommt darauf an An Die Zusammenspiel von mehrere Variablen solch als Mobile Phase Zusammensetzung, Puffer pH-Wert, fließen Rate, Spalte Chemie, Temperatur, Die Typ von Detektor Das Du entscheiden Zu verwenden für Die Analyse. Alle von diese Parameter brauchen Zu Sei Bußgeld- abgestimmt Und kontrolliert während Die Trennung Verfahren In Befehl Zu erreichen Die gewünscht Trennung. Damhirschkuh dürfen Sei sehr nützlich gegen eins Faktor bei a Zeit Ansatz.
Eins Faktor bei a Zeit Ansatz beteiligt Die Variation von eins Parameter bei a Zeit, Aufrechterhaltung Die andere Konstante. Das Mai führen Zu a groß Experimental- laufen, Mangel von Information Weil es gibt Mangel von Untersuchung An Faktoren Interaktionen. Mangel von Information Auch führt Zu zusätzlich Experimente während Verfahren Validierung, welche Mai verlängern sogar mehr Die Verfahren Entwicklung Verfahren Und Endlich verzögern Die gesamt Produkt Entwicklung.
Damhirschkuh, In Vergleich Zu eins Faktor bei a Zeit Ansätze, Damhirschkuh ermöglicht Die Variation von mehrere Parameter bei a Zeit. Das erlauben, mit a reduziert Nummer von Experimente, Zu untersuchen a groß Nummer von Faktoren, einschließlich Die Wechselwirkungen zwischen ihnen. Auch Die Entwicklung von mathematisch Modelle Das erlauben Die Bewertung von Relevanz Und Die statistische Bedeutung Zu erleichtern alle Die Schritte erforderlich während Verfahren Validierung. Damhirschkuh ermöglicht Wirklich Zu untersuchen a breit Design Raum mit weniger Ressourcen, Also In a mehr effizient Weg. In Tatsache, I wie sagen Damhirschkuh ermöglicht Schneller, günstiger, Und intelligenter Experimente zu liefern stärker Und besser analytisch Methoden.
In der heutigen sprechen, Ich bin gehen Zu sprechen Du durch a Teilt Damhirschkuh Ansatz für Die Entwicklung von a Kation Austausch Chromatographie Verfahren. Kation Austausch Chromatographie Ist gebraucht für Die Analyse von Aufladung Varianten. Speziell, Wenn Du sehen Hier An Die links Hand Seite von Das gleiten, Du dürfen sehen a Chromatogramm von a Protein Wo Du dürfen sehen manche sauer Spezies Hier An Die links, [unverständlich 00:07:17] An Die links von a hauptsächlich Spezies Gipfel, Und manche Basic Spezies Gipfel.
Alle diese sauer Basic Spezies dürfen Sei gebildet fällig Zu Die Gegenwart von chemisch Änderung Das dürfen führen Zu oberflächlich Aufladung Verteilung Variation In Die Protein. Kation Austausch Chromatographie Methoden Sind ganz Komplex Chromatographie Methoden Weil Die Trennung Effizienz Ist betroffen von a Nummer von Faktoren Und ganz empfindlich Zu klein Änderungen von diese Faktoren solch als Spalte Chemie, Mobile Phase pH-Wert, Temperatur, fließen Rate, Inhalt von Salz, Zeit von Die Trennung.
In Das Ansatz, Ich bin gehen Zu sprechen Du durch ein effizient Weg Zu entwickeln Kation Austausch Chromatographie Verfahren mit Damhirschkuh. Wenn Du Sind vertraut mit Damhirschkuh, Du Mai wissen Das oft erfordert a sequentiell Ansatz. In Das Experiment, I durchgeführt a hauptsächlich Effekte Screening Design für Aktivieren Die Auswahl von Die am besten Spalte Chemie Und Die Mobile Phase pH für Die Aufladung Varianz Trennung von dieses spezifische mAb Molekül.
Während Die zweite Damhirschkuh, I verwenden Antwort Oberfläche Methodik, insbesondere a zentral Verbundwerkstoff Design Damhirschkuh, Zu optimieren Die Chromatographie Trennung von Ändern Die fließen Rate Und [unverständlich 00:09:36] . Lasst uns nehmen hinein mehr Detail In Die Erste Damhirschkuh Experiment. Das War a hauptsächlich Effekte Screening Design Wo I abgeschirmt vier Spalte Chemie gekauft von vier anders Anbieter, Agilent, Sepax, Phenomenex, Und Gewässer und I abgeschirmt a Reichweite von pH aus 5.5 Zu 6.5.
Mein Antwort War Die Experimental- Gipfel Kapazität, welche Ist a Parameter Das erzählt Du Die Effizienz von a chromatographisch Trennung, genau Die Nummer von Gipfel Das dürfen Sei getrennt innerhalb Die Chromatogramm, Die Chromatographie Zeit Das Du Satz. Andere Parameter solch als Konzentration von Puffer, Konzentration von Salz bei Die Start von Die Chromatographie Gradient, fließen Rate, Gradient Zeit, Form, Temperatur, Injektion Volumen, Konzentration, Und Die UV Absorption war gehalten Konstante.
Diese Sind Die Ergebnisse für Die Erste Damhirschkuh. An Die links Hand Seite, Du dürfen sehen Die vier anders Spalte Ergebnisse. Du dürfen sehen Wie Die Experimental- Gipfel Kapazität Änderungen gegenüber Die pH ändern In Die Mobile Phase In alle Die vier anders Spalten. Du dürfen sehen Das Wir Ziel Zu haben hoch Experimental- Gipfel Kapazität Werte. Du dürfen sehen Das Die Phänomenex Spalte durchgeführt am besten.
In alle von diese drei Spalten, Wir dürfen sehen Das pH von 6.5 ermöglicht größer Experimental- Gipfel Kapazitäten. Aber Die Phänomenex Spalte erlaubt für besser Trennung Ergebnisse. Es Ist Auch sichtbar An Die Rechts Hand Seite von Das gleiten In Die Bedienfeld A. Du dürfen sehen bei pH 6,5, Wie Die Trennung unterscheidet sich Wann mit anders Chromatographie Spalten.
Wir haben Agilent , Gewässer , Phänomenex , Und Sepax . Definitiv, Die Trennung von Die Aufladung Varianten mit Die Phänomenex Spalte Ist viel besser als In Die andere Weil diese sauer Gipfel Sind sehr Also getrennt als Also als diese Basic Spezies Hier aus Die hauptsächlich Produkt Gipfel.
Panel B, Wir haben isoliert nur Die Ergebnisse von Die Phänomenex Spalte. Wie Die Chromatographie Trennung War Das mit Die Mobile Phase oder mit pH 5.5, 6.0 und 6.5. Wir dürfen sehen Wie Die Trennung verbessert mit Die Zunahme im pH-Wert. Offensichtlich, Die Mobile Phase pH Ist diktiert von Die intrinsisch Molekül Pi. Wir könnte nur untersuchen Das Reichweite. Ansonsten, Die Molekül würde haben kämpfte Zu finden es ist eigen Spalte.
Basierend An unser grundlegend Wissen von Chromatographie Trennung mit Kation Austausch Spalten, Wir entschieden Das Das Parameter, Also Das Phänomenex Spalte Und pH von 6,5, war optimal Zu tragen An Entwicklung. Wir getragen An mit Die zweite Damhirschkuh mit a zentral Verbundwerkstoff Design.
Zentral Verbundwerkstoff Design Ist a Typ von Damhirschkuh fallen innerhalb Die Regenschirm von Antwort Oberfläche Methodik, welche Ist gebraucht für optimiert Bedingungen zur Untersuchung Die Gegenwart von Krümmung, für Beispiel, Und extrapolieren optimal Werte. In Das Fall, Wir verwenden unser Phänomenex Spalte Und Mobile Phase pH von 6,5 und gestartet Zu spielen mit andere Parameter solch als Puffer Konzentration, Konzentration von Die Salz bei Die Start von Die Gradient, Und fließen Rate Zu untersuchen optimal Bedingungen.
Zentral Verbundwerkstoff Design ermöglicht Zu sehr effizient, mit a wenige Nummer von läuft, Zu identifizieren optimal Trennung Bedingungen, optimal Verfahren Bedingungen. In Tatsache, bei Die sehr Ende von Die Teilt Damhirschkuh Ansatz, Wir könnte sagen Das mit Die Untersuchung von vier Spalte, Mobile Phase, pH Reichweite, Salz Zusammensetzung, Gradient fließen Rate. Mit nur 27 Experimental- läuft, Wir könnte optimieren a Verfahren für ein monoklonaler Antikörper. Das Verfahren Ist sehr nützlich Weil Es Ist Jetzt gebraucht als a schnell, hoch Durchsatz Screening Experiment. In a schnell, hoch Durchsatz analytisch Verfahren für Screening Unterschiede In Die Aufladung Varianz Profil von diese spezifisch Moleküle ausgedrückt In anders Bedingungen Und vergleichen Es Zu a Standard.
Du dürfen sehen Hier Das Die Blau Linie Ist unser Referenz Standard Und Die Rot Linie Ist a Stress Material von Die Dasselbe Molekül. Du dürfen sehen Wie Die Aufladung Varianz Profil geändert als a Folge von Die Stress Zustand angewandt Zu Das Molekül. Das War erreicht Danke Zu Das analytisch Verfahren welche War entwickelt Und optimiert mit a Damhirschkuh Ansatz.
Wir Auch entschieden Zu implementieren Das Damhirschkuh Ansatz als a Plattform Workflow für analytisch Verfahren Entwicklung für neu Produkte, neu War Pharmazeutika und Wir abgeschirmt a Nummer von Produkte. Für alle von ihnen, Wir angewandt Erste Die Erste hauptsächlich Wirkung Bildschirm Design, Und Wir identifiziert Die am besten Spalte Und Mobile Phase pH Zu verwenden. Zweitens, Wir angewandt Die zentral Verbundwerkstoff Design Zu optimieren Die Trennung.
Jetzt, Wir haben identifiziert a Plattform Spalte Und a Mobile Phase Zusammensetzung für Das Klasse von Therapeutika. Wann neu Moleküle kommt hinein Die Pipeline, Wir dürfen sehr schnell, Nur von mit a zentral Verbundwerkstoff Design, welche beinhaltet Genau genommen Nur 12 läuft, optimieren Die Chromatographie Profil Und liefern ein optimal Kation Austausch Verfahren für a spezifisch Produkt.
Der Schlüssel nehmen- heim Nachrichten aus Mein sprechen Heute Ist Das Damhirschkuh System Verfahren Entwicklung gefolgt von geeignet statistische Analyse ermöglicht Zu planen Experiment basierend An Zeit, kosten, Und analytisch Ressourcen verfügbar sehr effizient, Und Zeitplan Die Ausführung von Experimente mit angemessen Probe Typ Und Größe Zu extrapolieren Die maximal Menge von Information aus unser chemisch Daten und effizient Adresse Die Herausforderungen Und Ziele von Die beabsichtigt Forschung.
Es definitiv spart Zeit Und kosten für Experiment Ausführung In Vergleich Zu eins Faktor bei a Zeit Ansätze. Am meisten besonders, Es erlaubt Die Komplexität von analytisch Verfahren Entwicklung, Aber Trotzdem verhörend mehrere Faktor bei a Zeit Und Studium Die Wirkung von beide Person Verfahren Parameter Und Die Interaktion An Die abhängig Variable.
Mit heutigen sprechen, I Hoffnung I inspiriert Du Zu anwenden mehr Damhirschkuh In dein Experimente. Dank Du sehr viel, alle, für dein Aufmerksamkeit. Wenn Du haben beliebig Fragen, fühlen frei Zu erreichen aus Zu Mich. Dank Du.
