| Vocero |
Transcripción |
| Evan Becker |
Hola, este es el |
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Equipo de investigación oncológica de BJU 2019. |
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Mi nombre es Evan Becker y hoy me acompaña Luke Brown, |
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Emily Swagger, Rachel Westfall y todos nosotros estamos bajo la dirección del Dr. Stephen Figard en el Departamento de Biología de la Universidad Bob Jones. |
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Nuestro trabajo, nuestra presentación, trata sobre la caracterización del peso molecular de un componente de la almendra que resulta citotóxico para las líneas celulares de cáncer gastrointestinal. |
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Muy bien, para la introducción. |
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El cáncer colorrectal es actualmente motivo de gran preocupación en la comunidad médica, ya que es la tercera causa principal de muerte por cáncer tanto en hombres como en mujeres en todo el país. |
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Investigaciones previas del laboratorio de cáncer de BJU han mostrado resultados prometedores al demostrar que las almendras tienen un efecto citotóxico sobre el cáncer colorrectal LoVo in vitro. |
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También se utilizó un procedimiento de pseudodigestión para un extracto de almendra como forma de imitar cómo funcionaría el extracto en un sistema fisiológico. |
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Se demostró que el mismo extracto de almendra induce una respuesta dependiente de la dosis en la línea celular de adenocarcinoma gástrico humano AGS. |
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Además, este extracto no provoca efectos negativos en la línea celular epitelial de colon humano CCD, lo que indica que los efectos citotóxicos de las almendras no afectan a las células sanas normales. |
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Haciendo pasar nuestro extracto de almendras a través de filtros con un límite de exclusión de peso molecular de 100.000 Dalton y 5.000 Dalton respectivamente, |
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Pudimos determinar que las moléculas presentes en las almendras que inducen el conjunto de efectos tóxicos deben ser menores de 5000 Dalton. |
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Como resultado, se determinó que los polifenoles eran una posible causa del efecto citotóxico y se realizó un estudio con extracto de polifenoles en almendras, observándose efectos citotóxicos muy similares en las líneas celulares cancerosas. |
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Creo que estamos listos. |
| Rachel Westphal |
Entre las líneas celulares que utilizamos se incluyen AGS, que es de cáncer de estómago; LoVo, que es de cáncer de colon; y CCD, que era nuestra línea celular normal. |
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Utilizamos 5-fluorouracilo como control positivo para la muerte celular. Y utilizamos una pseudodigestión in vitro de las almendras para imitar la digestión fisiológica... digestión fisiológica. |
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En el ensayo de proliferación celular WST, lo utilizamos para determinar la absorbancia con un lector de placas y usarla para calcular el porcentaje de viabilidad. |
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Posteriormente, se utilizó JMP para el análisis estadístico. Empleamos el análisis ANOVA, la prueba HSD de Tukey-Kramer y las pruebas de Wilcoxon y de comparación no paramétrica. Se consideraron estadísticamente significativos los valores de p inferiores a 0,05. |
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Podemos pasar a la siguiente diapositiva. Sí. |
| Luke Brown |
Muy bien. El primer conjunto de pruebas que me gustaría presentarles son pruebas relacionadas con la línea celular de cáncer humano AGS, y esta es un adenocarcinoma gástrico humano. |
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JMP fue una herramienta importante para nosotros porque nos ayudó, en primer lugar, a determinar la desviación estándar en algunos estudios piloto que realizamos. |
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Esto nos permitió entonces utilizar el software para realizar un análisis de potencia para determinar el tamaño de nuestra muestra. Ahora, observando algunos de los datos que obtuvimos aquí, |
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En primer lugar, verá que tanto la Figura 1 como la Figura 2 tienen en común la solución salina tamponada con fosfato PBS y el 5-FU o 5-fluorouracilo. |
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que es un tratamiento oncológico bien documentado y establecido para el cáncer, como el cáncer gástrico y el colorrectal. Ahora quisiera llamar su atención sobre la Figura 1. |
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Estudios previos realizados en nuestro laboratorio ya habían demostrado que el extracto de almendras parece tener algún tipo de efecto citotóxico selectivo para estas líneas celulares cancerosas. |
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Bueno, esperamos establecer en la Figura 1 que, en primer lugar, es el efecto de la dosis. Y en segundo lugar, queríamos acotar |
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¿Qué peso molecular tendríamos que analizar para determinar qué compuesto o compuestos son responsables de este efecto? |
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Como pueden ver, al aumentar la concentración de extracto de almendras desde un 12 % hasta un 100 %, observamos una relación dosis-respuesta. Pudimos comprobarlo mediante la prueba HSD de Tukey-Kramer en JMP, lo que nos permitió determinar que estos grupos presentan diferencias estadísticamente significativas. |
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Ahora puedes ver que tanto el filtro de corte de peso molecular de 100.000 como el filtro de corte de peso molecular inferior a 5000 |
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Son estadísticamente iguales al extracto de almendra 100%. Esto nos llevó a creer que el compuesto o compuestos responsables de este efecto serán relativamente pequeños, con un peso molecular inferior a 5000 Dalton. |
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En vista de esto, pasamos a la Figura 2 y analizamos algunas investigaciones que muestran que los flavonoides han demostrado tener un efecto similar en las nueces. |
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cianidina, delfinidina, malvidina y petunidina. |
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Como puede verse, tanto el extracto como todos estos flavonoides resultaron ser más eficaces que el 5-FU en este tratamiento. |
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Así pues, teniendo en cuenta esta información, voy a pasarle la siguiente diapositiva a Emily para que os dé más información sobre otro conjunto de datos. |
| Emily |
Para asegurarnos de que no nos limitábamos a observar resultados específicos de AGS, también analizamos otra línea celular cancerosa llamada LoVo. LoVo es una línea celular de cáncer de colon. |
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Como pueden ver, no realizamos todos los tratamientos de dosificación extensos en este caso en particular, porque ya lo habíamos demostrado con AGS. Simplemente estábamos observando particularmente |
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¿Esto es particular de una línea específica? Por ejemplo, en el caso de LoVo, se puede observar que no tenemos un valor tan bajo para 5-FU. |