こんにちは、みんな。 ありがとうあなたのために接合私の話す。 私午前ジュリアランビア、私はあるシニア科学者でアストラゼネカ。 私仕事でバイオ医薬品発達での分析的科学チーム。 今日、私欲しいあなた話すあなたへについての使用のDoEのためにの発達の分析的特徴づけメソッド、橋特にクロマトグラフィー方法。
で今日の話す、私は行くあなた話すについて治療的なタンパク質、何彼らはは、そしてなぜ彼らはは挑戦的のために分析的テスト、そして導入あなたあなたの使用のデザインの実験のために分析的方法発達そしての応用のDoEのためにの発達の充電分散方法、特にカチオン交換クロマトグラフィー方法。
に始めるオフ、タンパク質治療薬は本質的にとても複雑な二あなた彼らのより大きなサイズそしての面前のポスト-翻訳的な修正、そしてまた化学薬品修正それ犬のタンパク質受けるを通してその間のプロセスの表現で細胞、精製、そしてストレージ。
モノクローナル抗体支配するのバイオ医薬品市場、代表するについて70 %のの合計販売のバイオ医薬品製品。 しかし、最近、そこにははある押すのために新しい製品、次世代バイオ医薬品、どれのは二重特異性抗体、抗体断片、融合タンパク質、そして多くの他のフォーマット。 全ての彼らどうやってと個性的課題二あなた彼らの複雑な構造そして面前のより高い注文構造、グリコフォーム、充電亜種、の硫酸塩債券、酸化した脱アミド化された種、異性化、集計、断片化。
あllのこれら修正、化学薬品プロセス[聞き取れない 00:02:37]修正、犬インパクト氏効力、安全性、品質のの最後の薬製品。 これはなぜ徹底した分析的特徴づけそして分析的テスト全体を通して全てのインターンシップの製品人生サイクルは鍵あなた会う規制上の規格、あなた良い有効あなた届けるある製品それ会う規制上の品質プロフィール。
私たちは使用あるたくさんのの分析的テクニックのために分析するタンパク質、そしてこれらはベースのたいてい氏クロマトグラフィーメソッド、電気泳動メソッド、そして[聞き取れない 00:03:25] 。 二あなたの固有の構造的な複雑のタンパク質、分析的方法発達犬良いやめる挑戦的。
で今日の話す、私は行くあなた具体的には話すについてクロマトグラフィーメソッドそしての使用のデザインの実験あなたヘルプの発達のクロマトグラフィー分離。 クロマトグラフィー方法犬良いやめる複雑な、特にもしあなた持っているある複雑な検体のようにあるタンパク質。 これはなぜならの分離依存します氏の相互作用のいくつかの変数そのようなとして携帯段階構成、バッファpH、流れ料金、カラム化学、温度、のタイプの検出器それあなた決めるあなた使用のためにの分析。 全てのこれらパラメーター必要あなた良い大丈夫-調整されたそして制御されたその間の分離プロセスで注文あなた成し遂げるの望ましい分離。 DoE犬良いとても役に立つ対1つ要素である時間アプローチ。
1つ要素である時間アプローチ関与したの変化の1つパラメーターである時間、維持するの他の絶え間ない。 これ5月鉛あなたある広い実験的な走る足らないの情報なぜならあるよ足らないの調査氏要因相互作用。 漆器の情報またリードあなた追加実験その間方法検証、どれの5月長くする平もっとの方法発達プロセスそしてついに遅れの全体製品発達。
エネルギー省、で比較あなた1つ要素である時間アプローチし、 DoE有効にするの変化の複数パラメーターである時間。 これ許可するとある削減番号の実験、あなた調査するある広い番号の要因、含むの相互作用間彼ら。 またの発達の数学的モデルそれ許可するの評価の関連性そしての統計的意義あなた促進する全てのステップ必須その間方法検証。DoE有効にする本当にあなた調査するある広いデザイン空間と少ないリソース、私はであるもっと効率的方法。 で実は私のように言ってるDoE有効にするもっと早く、より安く、そしてより賢い実験する届けるより強くそしてより良い分析的方法。
今日では話す、私は行くあなた話すあなたを通してあるスプリットDoEアプローチのためにの発達のあるカチオン交換クロマトグラフィー方法。 カチオン交換クロマトグラフィーは使用済みのためにの分析の充電亜種。 具体的には、もしあなた見るここ氏の左手サイトのこれスライド、あなた犬見るあるクロマトグラムのあるタンパク質どこあなた犬見るいくつかの酸性の種ここ氏の左、 [聞き取れない 00:07:17]氏の左のある主要種ピーク、そしていくつかの基本的な種ピーク。
全てこれら酸性の基本的な種犬良い形成された二あなたの面前の化学薬品修正それ犬鉛あなた表面的な充電分布変化でのタンパク質。 カチオン交換クロマトグラフィーメソッドはやめる複雑なクロマトグラフィーメソッドなぜならの分離効率は影響を受けるによるある番号の要因そしてやめるセンシティブあなた小さい変化のこれら要因そのようなとしてカラム化学、携帯段階pH、温度、流れ料金、ハッピーのジャンプ、時間のの分離。
でこれアプローチ、私は行くあなた話すあなたを通しての効率的方法あなた開発するカチオン交換クロマトグラフィー方法を使用してDoE。 もしあなたはおなじみとエネルギー省、あなた5月知るそれ頻繁必要ある一連アプローチ。 でこれ実験、私実行されましたある主要効果ふるい分けデザインのために有効にするの選択のの最高カラム化学そしての携帯段階pHのためにの充電分散分離のこの特定のモノクローナル抗体分子。
その間の2番エネルギー省、私使用応答表面方法論、特にある中央複合デザインエネルギー省、あなた最適化するのクロマトグラフィー分離による変化の流れレートそして[聞き取れない 00:09:36] 。 しましょう取るの中へもっと詳細での初めDoE実験 これだったある主要効果ふるい分けデザインどこ私上映された四カラム化学買ったによる四違うプロバイダー、アジレント、セパックス、フェノメネックス、そしてウォーターズさんと、私上映されたある範囲のpHから5.5あなた6.5.
私の応答だったの実験的なピーク容量、どれのはあるパラメーターそれ言うあなたの効率のあるクロマトグラフィー分離、正確にの番号のピークそれ犬良い別れた内でのクロマトグラム、のクロマトグラフィー時間それあなた9月 他のパラメーターそのようなとして集中のバッファ、集中の飛びつくの始めるののクロマトグラフィー勾配、流れ料金、勾配時間、形、温度、注射音量、集中、そしての紫外線吸光度だった保たれた絶え間ない。
これらはの結果のためにの初めDoE。 ホンの左手側面、あなた犬見るの四違うカラム結果。 あなた犬見るどうやっての実験的なピーク容量変化と変化のpH変化での携帯段階で全ての四違う列。 あなた犬見るそれ私たちは標的あなた持っている高い実験的なピーク容量価値観。 あなた犬見るそれの現象カラム実行されました最高。
で全てのこれら三つ列、私たちは犬見るそれpHの6.5有効にするより大きな実験的なピーク能力。 しかしの現象カラム許可されたのためにより良い分離結果。 それはまた見える氏の右手サイトのこれ滑り台でのパネルA. あなた犬見るでpH 6.5、どうやっての分離異なるいつを使用して違うクロマトグラフィー列。
私たちは持っているアジレント、ウォーターズ、現象、そしてセパックス。 絶対に、の分離のの充電バリエーションを使用しての現象カラムは多くのより良いよりもでのその他なぜならこれら酸性のピークはとても良い別れたとして良いとしてこれら基本的な種ここからの主要製品ピーク。
パネルB、私たちは持っている孤立したのみの結果のの現象カラム。 どうやってのクロマトグラフィー分離だったそれとの携帯段階今とpH 5.5、6.0、および6.5. 私たちは犬見るどうやっての分離改善するとの増加pHで。 もちろん、の携帯段階pHは口述されたによるの本質的な分子ピ。 私たちはできたのみ調査するこれ範囲。 さもないと、の分子するだろう持っている苦労したあなた探すその自分のカラム。
ベース氏私たちの基本的知識のクロマトグラフィー分離とカチオン交換列、私たちは決めたそれこれパラメーター、私はこれ現象カラムそしてpHの6.5、だった最適なあなた運ぶ氏発達。 私たちは運ばれた氏との2番DoEを使用してある中央複合デザイン。
中央複合デザインはあるタイプのDoE落下内での傘の応答表面方法論、どれのは使用済みのために最適化された条件調査するための面前の曲がる、のために実例、そして外挿する最適な価値観。 でこれ住宅、私たちは使用私たちの現象カラムそして携帯段階pHの6.5、および始めましたあなた遊ぶと他のパラメーターそのようなとしてバッファ集中、集中ののジャンプでの始めるのの勾配、そして流れレートあなた調査する最適な条件。
中央複合デザイン有効あなたとても効果的に、とある少し番号の走る、あなた識別する最適な分離条件、最適な方法条件。 で実はでのとても終わりののスプリットDoEアプローチ、私たちはできた言うそれとの調査の四列、携帯段階、 pH範囲、ジャンプ構成、勾配流れレート。 とのみ27実験的な走る、私たちはできた最適化するある方法のためにモノクローナル抗体。 これ方法はとても役に立つなぜならそれは今使用済みとしてある素早い、高いスループットふるい分け実験 である素早い、高いスループット分析的方法のためにふるい分け違いでの充電分散プロフィールのこれら特定の分子表現されたで違う条件そして表示されますそれあなたある標準。
あなた犬見るここそれの青ラインは私たちの参照標準そしての編ラインはあるストレス材料のの同じ分子。 あなた犬見るどうやっての充電分散プロフィールかわったとしてある結果ののストレス状態適用済みあなたこれ分子。 これだった達成ありがとうあなたこれ分析的方法どれのだった発展したそして最適化されたとあるDoEアプローチ。
私たちはまた決めたあなた埋め込むこれDoEアプローチとしてあるプラットホームワークフローのために分析的方法発達のために新しい製品、新しいバイオ医薬品、および私たちは上映されたある番号の製品。のために全ての彼ら私たちは適用済み初めの初め主要効果画面デザイン、そして私たちは特定されたの最高カラムそして携帯段階pHあなた使用 第二に、私たちは適用済みの中央複合デザインあなた最適化するの分離。
今、私たちは持っている特定されたあるプラットホームカラムそしてある携帯段階構成のためにこれクラスの治療薬。 いつ新しい分子来るの中へのパイプライン、私たちは犬とても素早くただによるを使用してある中央複合デザイン、どれの含まれる実はただ12走る、最適化するのクロマトグラフィープロフィールそして届けるの最適なカチオン交換方法のためにある特定の製品。
の鍵取る-家メッセージから私の話す今日はそれDoEシステム方法発達フォローしましたによる適切な統計的分析有効にするあなたプラン実験ベースの氏時間、料金、そして分析的リソース利用可能とても効果的に、そしてスケジュールの実行の実験と十分なサンプルタイプそしてサイズあなた外挿するの最大額の情報から私たちの化学薬品データと効率的に住所の課題そして目標のの意味研究。
それ絶対に保存します時間そして料金のために実験実行で比較あなた1つ要素である時間近づいてきます。 ほとんど特に、それ許可しますの複雑の分析的方法発達、しかしまだ尋問するいくつかの要素である時間そして勉強するの効果の両方個人方法パラメーターそしての交流氏の依存変数。
と今日の話す、私希望私インスパイヤされたあなたあなた適用するもっとDoEであなたの実験。 ありがとうあなたとても多くのみんな、のためにあなたの注意 もしあなた持っているどれでも質問、感じる無料あなた到着外あなた自分 ありがとうあなた。
