Hola, todos. Gracias tú para unión mi hablar. I soy julia lambia, Soy a Sénior Científico en AstraZeneca. I trabajar en biofarmacéutico desarrollo en el analítico ciencia equipo. Hoy, I desear tú hablar A usted acerca de el usar de Gama para el desarrollo de analítico caracterización métodos, puente especialmente cromatografía métodos.
En de hoy hablar, Soy yendo tú hablar acerca de terapéutico proteínas, qué ellos son, y por qué ellos son desafiante para analítico pruebas, y introducir tú tú el usar de diseño de experimento para analítico método desarrollo y el solicitud de Gama para el desarrollo de cargar diferencia métodos, específicamente catión intercambio cromatografía método.
A comenzar apagado, proteína terapéutica son inherentemente muy complejo dos tú su más grande tamaño y el presencia de el cargo- traslacional modificación, y también químico modificaciones eso perro el proteína someterse a través de durante el procesos de expresión en células, purificación, y almacenamiento.
monoclonal anticuerpos dominar el biofarmacéutico mercado, representando acerca de 70 % de el total ventas de biofarmacéutico productos. Sin embargo, recientemente, allá es a empujar para nuevo productos, próximo generación biofarmacéuticos, cual son biespecífico anticuerpos, anticuerpo fragmento, fusión proteínas, y muchos otro formatos. Todo de a ellos cómo con único desafíos dos tú su complejo estructura y presencia de más alto orden estructura, glico formas, cargar variantes, el sulfato cautiverio, oxidado desamidado especies, isomerización, agregación, fragmentación.
A todos de estos modificación, químico proceso [inaudible 00:02:37] modificación, perro impacto Señor potencia, seguridad, calidad de el final droga producto. Este es por qué exhaustivo analítico caracterización y analítico pruebas a lo largo de todo el pasantías de producto vida ciclo es llave tú encontrarse regulador estándares, tú Bueno activado tú entregar a producto eso Satisface regulador calidad perfil.
Nosotros usar a plétora de analítico técnicas para analizando proteínas, y estos son basado principalmente Señor cromatografía métodos, electroforético métodos, y [inaudible 00:03:25] . Dos tú el inherente estructural complejidad de proteínas, analítico método desarrollo perro Bueno abandonar desafiante.
En de hoy hablar, Soy yendo tú específicamente hablar acerca de cromatografía métodos y el usar de diseño de experimento tú ayuda el desarrollo de cromatografía separación. cromatografía método perro Bueno abandonar complejo, especialmente si tú tener a complejo analito como a proteína. Este es porque el separación depende Señor el interacción de varios variables semejante como móvil fase composición, buffer pH, fluir tarifas, columna química, temperatura, el tipo de detector eso tú decidir tú usar para el análisis. Todo de estos parámetros necesidad tú Bueno bien- sintonizado y revisado durante el separación proceso en orden tú lograr el deseado separación. Gama perro Bueno muy útil vs uno factor en a tiempo acercarse.
Uno factor en a tiempo acercarse involucrado el variación de uno parámetros en a tiempo, manteniendo el otro constante. Este puede dirigir tú a amplio experimental correr falta de información porque hay falta de investigación Señor factores interacciones. Barniz de información también dirige tú adicional experimentos durante método validación, cual puede alargar incluso más el método desarrollo proceso y finalmente demora el en general producto desarrollo.
GAMA, en comparación tú uno factor en a tiempo enfoques, Gama permitir el variación de múltiple parámetros en a tiempo. Este permitir con a reducido número de experimentos, tú investigar a amplio número de factores, incluido el interacciones entre a ellos. También el desarrollo de matemático modelos eso permitir el evaluación de Relevancia y el estadístico significado tú facilitar todo el pasos requerido durante método validación.Gama permitir en realidad tú investigar a ancho diseño espacio con menos recursos, soy en a más eficiente forma. En de hecho I como dicho Gama permitir más rápido, más económico, y más inteligente experimentos para entregar más fuerte y mejor analítico métodos.
en la actualidad hablar, Soy yendo tú hablar tú a través de a dividir Gama acercarse para el desarrollo de a catión intercambio cromatografía método. Catión intercambio cromatografía es usado para el análisis de cargar variantes. Específicamente, si tú ver aquí Señor el izquierda mano sitio de este diapositivas, tú perro ver a cromatograma de a proteína dónde tú perro ver alguno ácido especies aquí Señor el izquierda, [inaudible 00:07:17] Señor el izquierda de a principal especies cima, y alguno básico especies cima.
Todo estos ácido básico especies perro Bueno formado dos tú el presencia de químico modificación eso perro dirigir tú superficial cargar distribución variación en el proteína. Catión intercambio cromatografía métodos son abandonar complejo cromatografía métodos porque el separación eficiencia es afectado por a número de factores y abandonar sensible tú pequeño cambiar de estos factores semejante como columna química, móvil fase pH, temperatura, fluir tarifas, feliz de saltar, tiempo de el separación.
En este acercarse, Soy yendo tú hablar tú a través de un eficiente forma tú desarrollar catión intercambio cromatografía método usando Gama. Si tú son familiar con GAMA, tú puede saber eso a menudo requiere a secuencial acercarse. En este experimento, I realizado a principal efectos poner en pantalla diseño para habilitando el selección de el mejor columna química y el móvil fase pH para el cargar diferencia separación de este especifico mAb moléculas.
Durante el segundo GAMA, I usar respuesta superficie metodología, particularmente a central compuesto diseño GAMA, tú optimizar el cromatografía separación por cambiando el fluir tasa y [inaudible 00:09:36] . vamos llevar en más detalle en el primero Gama experimento Este era a principal efectos poner en pantalla diseño dónde I proyectado cuatro columna química compró por cuatro diferente proveedores, Agilent, Sepax, Phenoménex, y aguas, y I proyectado a rango de pH de 5.5 tú 6.5.
Mi respuesta era el experimental cima capacidad, cual es a parámetros eso dice tú el eficiencia de a cromatográfico separación, precisamente el número de picos eso perro Bueno apartado dentro el cromatograma, el cromatografía tiempo eso tú septiembre Otro parámetros semejante como concentración de buffer, concentración de saltar a el comenzar de el cromatografía degradado, fluir tarifas, degradado tiempo, forma, temperatura, inyección volumen, concentración, y el ultravioleta absorbancia eran conservó constante.
Estos son el resultados para el primero Gama. cariño el izquierda mano lados, tú perro ver el cuatro diferente columna resultados. Tú perro ver cómo el experimental cima capacidad cambios vs. el pH cambiar en el móvil fase en todo el cuatro diferente columnas. Tú perro ver eso nosotros apuntar tú tener alto experimental cima capacidad valores. Tú perro ver eso el Fenómeno columna realizado mejor.
En todo de estos tres columnas, nosotros perro ver eso pH de 6.5 permitir mayor que experimental cima capacidades. Pero el Fenómeno columna permitido para mejor separación resultados. Él es también visible Señor el bien mano sitio de este deslizar en el panel A. Tú perro ver en pH 6.5, cómo el separación diferir de cuando usando diferente cromatografía columnas.
Nosotros tener Agilent , aguas , Fenómeno , y Sepax . Definitivamente, el separación de el cargar variantes usando el Fenómeno columna es mucho mejor que en el otros porque estos ácido picos son muy Bueno apartado como Bueno como estos básico especies aquí de el principal producto cima.
Panel B, nosotros tener aislado solo el resultados de el Fenómeno columna. Cómo el cromatografía separación era eso con el móvil fase ahora con pH 5.5, 6.0 y 6.5. Nosotros perro ver cómo el separación mejora con el aumentar en pH. Por supuesto, el móvil fase pH es dictado por el intrínseco moléculas Pi. Nosotros podría solo investigar este rango. De lo contrario, el moléculas haría tener luchó tú encontrar es propio columna.
Basado Señor nuestro fundamental conocimiento de cromatografía separación con catión intercambio columnas, nosotros decidido eso este parámetros, soy este Fenómeno columna y pH de 6.5, eran óptimo tú llevar Señor desarrollo. Nosotros transportado Señor con el segundo Gama usando a central compuesto diseño.
Central compuesto diseño es a tipo de Gama descendente dentro el paraguas de respuesta superficie metodología, cual es usado para optimizado condiciones para investigar el presencia de enfermedad de buzo, para instancia, y extrapolar óptimo valores. En este casas, nosotros usar nuestro Fenómeno columna y móvil fase pH de 6.5, y comenzó tú jugar con otro parámetros semejante como buffer concentración, concentración de el saltar en el comenzar de el degradado, y fluir tasa tú investigar óptimo condiciones.
Central compuesto diseño activado tú muy efectivamente, con a pocos número de carreras, tú identificar óptimo separación condiciones, óptimo método condiciones. En de hecho en el muy fin de el dividir Gama acercarse, nosotros podría decir eso con el investigación de cuatro columnas, móvil fase, pH rango, saltar composición, degradado fluir tasa. Con solo 27 experimental carreras, nosotros podría optimizar a método para el monoclonal anticuerpo. Este método es muy útil porque él es ahora usado como a rápido, alto rendimiento poner en pantalla experimento En a rápido, alto rendimiento analítico método para poner en pantalla diferencias en el cargar diferencia perfil de estos específico moléculas expresado en diferente condiciones y aparece él tú a estándar.
Tú perro ver aquí eso el azul línea es nuestro referencia estándar y el ed línea es a estrés material de el mismo moléculas. Tú perro ver cómo el cargar diferencia perfil cambió como a consecuencia de el estrés condición aplicado tú este moléculas. Este era logrado gracias tú este analítico método cual era desarrollado y optimizado con a Gama acercarse.
Nosotros también decidido tú implementar este Gama acercarse como a plataforma flujo de trabajo para analítico método desarrollo para nuevo productos, nuevo biografía productos farmacéuticos y nosotros proyectado a número de productos.Para todo de a ellos nosotros aplicado primero el primero principal efecto pantalla diseño, y nosotros identificado el mejor columna y móvil fase pH tú usar En segundo lugar, nosotros aplicado el central compuesto diseño tú optimizar el separación.
Ahora, nosotros tener identificado a plataforma columna y a móvil fase composición para este clase de terapéutica. Cuando nuevo moléculas venir en el tubería, nosotros perro muy rápidamente justo por usando a central compuesto diseño, cual involucra de hecho justo 12 carreras, optimizar el cromatografía perfil y entregar un óptimo catión intercambio método para a específico producto.
El llave llevar- hogar mensajes de mi hablar hoy es eso Gama sistema método desarrollo seguido por adecuado estadístico análisis permitir tú plan experimento basado Señor tiempo, costo, y analítico recursos disponible muy efectivamente, y cronograma el ejecución de experimentos con adecuado muestra tipo y tamaño tú extrapolar el máximo cantidad de información de nuestro químico datos y eficientemente DIRECCIÓN el desafíos y objetivos de el quiso decir investigación.
Él definitivamente ahorras tiempo y costo para experimento ejecución en comparación tú uno factor en a tiempo enfoques. Mayoría especialmente, él permite el complejidad de analítico método desarrollo, pero aún interrogando varios factor en a tiempo y estudiando el efecto de ambos individual método parámetros y el interacción Señor el dependiente variable.
Con de hoy hablar, I esperanza I inspirado tú tú aplicar más Gama en su experimentos. Gracias tú muy mucho todos, para su atención Si tú tener cualquier preguntas, sentir gratis tú alcanzar afuera tú a mí Gracias tú.
