Ciao, tutti. Grazie Voi per unendosi Mio parlare. IO Sono Giulia Lambia, Io sono UN Anziano Scienziato A AstraZeneca. IO lavoro In biofarmaceutico sviluppo In IL analitico scienza squadra. Oggi, IO Volere Voi parlare a te Di IL utilizzo Di DoE per IL sviluppo Di analitico caratterizzazione metodi, ponte particolarmente cromatografia metodi.
In di oggi parlare, Io sono andando Voi parlare Di terapeutico proteine, Che cosa Essi Sono, E Perché Essi Sono stimolante per analitico test, E introdurre Voi Voi IL utilizzo Di progetto Di sperimentare per analitico metodo sviluppo E IL applicazione Di DoE per IL sviluppo Di carica varianza metodi, specificamente catione scambio cromatografia metodo.
Voi inizio spento, proteina terapeutica Sono intrinsecamente molto complesso due Voi loro più grandi misurare E IL presenza Di il post- traslazionale modifica, E Anche chimico modifiche Quello cane IL proteina subire Attraverso durante IL processi Di espressione In cellule, purificazione, E magazzinaggio.
Monoclonale anticorpi dominare IL biofarmaceutico mercato, che rappresentano Di 70 % Di IL totale saldi Di biofarmaceutico prodotti. Tuttavia, recentemente, Là È UN spingere per nuovo prodotti, Prossimo generazione prodotti biofarmaceutici, Quale Sono bispecifico anticorpi, anticorpo frammento, fusione proteine, E molti altro formati. Tutto Di loro Come con unico sfide due Voi loro complesso struttura E presenza Di più alto ordine struttura, glico forme, carica varianti, IL solfato obbligazioni, ossidato deamidato specie, isomerizzazione, aggregazione, frammentazione.
UN LL Di questi modifica, chimico processi [impercettibile 00:02:37] modifica, cane impatto Sig potenza, sicurezza, qualità Di IL finale farmaco Prodotto. Questo È Perché completo analitico caratterizzazione E analitico test per tutto Tutto IL tirocini Di Prodotto vita ciclo È chiave Voi Incontrare normativo standard, Voi BENE abilitato Voi consegnare UN Prodotto Quello incontra normativo qualità profilo.
Noi utilizzo UN pletora Di analitico tecniche per analizzando proteine, E questi Sono basato soprattutto Sig cromatografia metodi, elettroforetico metodi, E [impercettibile 00:03:25] . Due Voi IL inerente strutturale complessità Di proteine, analitico metodo sviluppo cane BENE esentato stimolante.
In di oggi parlare, Io sono andando Voi specificamente parlare Di cromatografia metodi E IL utilizzo Di progetto Di sperimentare Voi aiuto IL sviluppo Di cromatografia separazione. Cromatografia metodo cane BENE esentato complesso, particolarmente Se Voi Avere UN complesso analita Piace UN proteina. Questo È Perché IL separazione dipende Sig IL interazione Di parecchi variabili come COME mobile fase composizione, respingente pH, fluire aliquote, colonna chimica, temperatura, IL tipo Di rivelatore Quello Voi decidere Voi utilizzo per IL analisi. Tutto Di questi parametri Bisogno Voi BENE Bene- sintonizzato E controllato durante IL separazione processi In ordine Voi raggiungere IL desiderato separazione. DoE cane BENE molto utile contro uno fattore A UN tempo approccio.
Uno fattore A UN tempo approccio coinvolto IL variazione Di uno parametri A UN tempo, mantenendo IL altro costante. Questo Maggio Guida Voi UN ampio sperimentale correre mancanza Di informazione Perché c'è mancanza Di indagine Sig fattori interazioni. Lacca Di informazione Anche conduce Voi aggiuntivo esperimenti durante metodo convalida, Quale Maggio allungare Anche Di più IL metodo sviluppo processi E Finalmente ritardo IL complessivamente Prodotto sviluppo.
DOE, In confronto Voi uno fattore A UN tempo approcci, DoE abilitare IL variazione Di multiplo parametri A UN tempo. Questo permettere con UN ridotto numero Di esperimenti, Voi indagare UN ampio numero Di fattori, Compreso IL interazioni fra loro. Anche IL sviluppo Di matematico Modelli Quello permettere IL valutazione Di pertinenza E IL statistico significato Voi facilitare Tutto IL passi necessario durante metodo convalida.DoE abilitare Veramente Voi indagare UN Largo progetto spazio con meno risorse, sono In UN Di più efficiente modo. In In realtà IO Piace detto DoE abilitare Più veloce, più economico, E più intelligente esperimenti a consegnare più forte E Meglio analitico metodi.
In quello di oggi parlare, Io sono andando Voi parlare Voi Attraverso UN diviso DoE approccio per IL sviluppo Di UN catione scambio cromatografia metodo. Catione scambio cromatografia È usato per IL analisi Di carica varianti. Nello specifico, Se Voi Vedere Qui Sig IL Sinistra mano luogo Di Questo diapositive, Voi cane Vedere UN cromatogramma Di UN proteina Dove Voi cane Vedere Alcuni acido specie Qui Sig IL Sinistra, [impercettibile 00:07:17] Sig IL Sinistra Di UN principale specie picco, E Alcuni di base specie picco.
Tutto questi acido di base specie cane BENE formato due Voi IL presenza Di chimico modifica Quello cane Guida Voi superficiale carica distribuzione variazione In IL proteina. Catione scambio cromatografia metodi Sono esentato complesso cromatografia metodi Perché IL separazione efficienza È ricercato di UN numero Di fattori E esentato sensibile Voi piccolo modifica Di questi fattori come COME colonna chimica, mobile fase pH, temperatura, fluire aliquote, Contento Di salto, tempo Di IL separazione.
In Questo approccio, Io sono andando Voi parlare Voi Attraverso UN efficiente modo Voi sviluppare catione scambio cromatografia metodo utilizzando DoE. Se Voi Sono familiare con DOE, Voi Maggio Sapere Quello Spesso richiede UN sequenziale approccio. In Questo sperimentare, IO eseguita UN principale effetti selezione progetto per abilitare IL selezione Di IL migliore colonna chimica E IL mobile fase pH per IL carica varianza separazione Di questo specifico mAb molecole.
Durante IL secondo DOE, IO utilizzo risposta superficie metodologia, in particolar modo UN centrale composito progetto DOE, Voi ottimizzare IL cromatografia separazione di mutevole IL fluire valutare E [impercettibile 00:09:36] . andiamo Prendere in Di più dettaglio In IL Primo DoE sperimentare Questo era UN principale effetti selezione progetto Dove IO schermato quattro colonna chimica comprato di quattro diverso fornitori, Agilent, Sepax, Phenomenex, E Acque, e IO schermato UN allineare Di pH da 5.5 Voi 6.5.
Mio risposta era IL sperimentale picco capacità, Quale È UN parametri Quello racconta Voi IL efficienza Di UN cromatografico separazione, precisamente IL numero Di picchi Quello cane BENE separato entro IL cromatogramma, IL cromatografia tempo Quello Voi settembre Altro parametri come COME concentrazione Di respingente, concentrazione Di salta a IL inizio Di IL cromatografia pendenza, fluire aliquote, pendenza tempo, forma, temperatura, iniezione volume, concentrazione, E IL UV assorbanza erano tenuto costante.
Questi Sono IL risultati per IL Primo DoE. On IL Sinistra mano lati, Voi cane Vedere IL quattro diverso colonna risultati. Voi cane Vedere Come IL sperimentale picco capacità cambiamenti rispetto IL pH modifica In IL mobile fase In Tutto IL quattro diverso colonne. Voi cane Vedere Quello Noi scopo Voi Avere alto sperimentale picco capacità valori. Voi cane Vedere Quello IL Fenomeno colonna eseguita migliore.
In Tutto Di questi tre colonne, Noi cane Vedere Quello pH Di 6.5 abilitare maggiore sperimentale picco capacità. Ma IL Fenomeno colonna consentito per Meglio separazione risultati. Esso È Anche visibile Sig IL Giusto mano luogo Di Questo diapositiva In IL pannello UN. Voi cane Vedere A pH 6,5, Come IL separazione differire Quando utilizzando diverso cromatografia colonne.
Noi Avere Agilent , Acque , Fenomeno , E Sepax . Decisamente, IL separazione Di IL carica varianti utilizzando IL Fenomeno colonna È tanto Meglio di In IL altri Perché questi acido picchi Sono molto BENE separato COME BENE COME questi di base specie Qui da IL principale Prodotto picco.
Pannello B, Noi Avere isolato soltanto IL risultati Di IL Fenomeno colonna. Come IL cromatografia separazione era Quello con IL mobile fase Ora con pH 5.5, 6.0 e 6.5. Noi cane Vedere Come IL separazione migliora con IL aumento nel pH. Ovviamente, IL mobile fase pH È dettato di IL intrinseco molecole pi. Noi Potevo soltanto indagare Questo allineare. Altrimenti, IL molecole volevo Avere combattuto Voi Trovare suo Proprio colonna.
Basato Sig Nostro fondamentale conoscenza Di cromatografia separazione con catione scambio colonne, Noi deciso Quello Questo parametri, sono Questo Fenomeno colonna E pH Di 6,5, erano ottimale Voi trasportare Sig sviluppo. Noi portato Sig con IL secondo DoE utilizzando UN centrale composito progetto.
Centrale composito progetto È UN tipo Di DoE cadente entro IL ombrello Di risposta superficie metodologia, Quale È usato per ottimizzato condizioni per indagare IL presenza Di si piega, per esempio, E estrapolare ottimale valori. In Questo case, Noi utilizzo Nostro Fenomeno colonna E mobile fase pH Di 6.5 e iniziato Voi giocare con altro parametri come COME respingente concentrazione, concentrazione Di IL salto A IL inizio Di IL pendenza, E fluire valutare Voi indagare ottimale condizioni.
Centrale composito progetto abilitato Voi molto effettivamente, con UN pochi numero Di corre, Voi identificare ottimale separazione condizioni, ottimale metodo condizioni. In In realtà A IL molto FINE Di IL diviso DoE approccio, Noi Potevo Dire Quello con IL indagine Di quattro colonne, mobile fase, pH allineare, salto composizione, pendenza fluire valutare. Con soltanto 27 sperimentale corre, Noi Potevo ottimizzare UN metodo per il monoclonale anticorpo. Questo metodo È molto utile Perché Esso È Ora usato COME UN presto, alto portata selezione sperimentare In UN presto, alto portata analitico metodo per selezione differenze In IL carica varianza profilo Di questi specifica molecole espresso In diverso condizioni E appare Esso Voi UN standard.
Voi cane Vedere Qui Quello IL blu linea È Nostro riferimento standard E IL ed linea È UN fatica Materiale Di IL Stesso molecole. Voi cane Vedere Come IL carica varianza profilo cambiato COME UN conseguenza Di IL fatica condizione applicato Voi Questo molecole. Questo era raggiunto Grazie Voi Questo analitico metodo Quale era sviluppato E ottimizzato con UN DoE approccio.
Noi Anche deciso Voi strumento Questo DoE approccio COME UN piattaforma flusso di lavoro per analitico metodo sviluppo per nuovo prodotti, nuovo bio prodotti farmaceutici e Noi schermato UN numero Di prodotti.Per Tutto Di loro Noi applicato Primo IL Primo principale effetto schermo progetto, E Noi identificato IL migliore colonna E mobile fase pH Voi utilizzo In secondo luogo, Noi applicato IL centrale composito progetto Voi ottimizzare IL separazione.
Ora, Noi Avere identificato UN piattaforma colonna E UN mobile fase composizione per Questo classe Di terapeutica. Quando nuovo molecole Venire in IL tubatura, Noi cane molto velocemente Appena di utilizzando UN centrale composito progetto, Quale coinvolge In realtà Appena 12 corre, ottimizzare IL cromatografia profilo E consegnare UN ottimale catione scambio metodo per UN specifica Prodotto.
IL chiave Prendere- casa messaggi da Mio parlare Oggi È Quello DoE sistema metodo sviluppo seguito di adeguata statistico analisi abilitare Voi piano sperimentare basato Sig tempo, costo, E analitico risorse disponibile molto effettivamente, E programma IL esecuzione Di esperimenti con adeguato campione tipo E misurare Voi estrapolare IL massimo quantità Di informazione da Nostro chimico dati e in modo efficiente indirizzo IL sfide E obiettivi Di IL significava ricerca.
Esso decisamente risparmi tempo E costo per sperimentare esecuzione In confronto Voi uno fattore A UN tempo approcci. Maggior parte particolarmente, Esso consente IL complessità Di analitico metodo sviluppo, Ma Ancora interrogando parecchi fattore A UN tempo E studiando IL effetto Di Entrambi individuale metodo parametri E IL interazione Sig IL dipendente variabile.
Con di oggi parlare, IO Speranza IO ispirato Voi Voi fare domanda a Di più DoE In tuo esperimenti. Grazie Voi molto tanto tutti, per tuo Attenzione Se Voi Avere Qualunque domande, Tatto gratuito Voi portata fuori Voi Me Grazie Voi.
