Desarrollo de métodos asistido por DoE para el análisis de variantes de carga de anticuerpos monoclonales mediante cromatografía de intercambio catiónicoLa cromatografía de intercambio catiónico (CEX) es el estándar de oro de la industria para el análisis de variantes de carga de productos biofarmacéuticos, como los anticuerpos monoclonales (mAb). Sin embargo, el desarrollo de métodos CEX de manera eficiente en términos de tiempo y recursos constituye un cuello de botella en la caracterización de proteínas. Las separaciones CEX son complejas y se rigen por múltiples factores, como la química de la columna, el tipo de gradiente, el caudal, la composición de la fase móvil y el pH. Varias publicaciones científicas han demostrado la aplicación exitosa del diseño de experimentos (DoE) en el desarrollo de métodos de cromatografía. Sin embargo, realizar DoE con una gran cantidad de factores puede ser desafiante, lento y costoso. Este trabajo ilustra el uso de un enfoque de DoE dividido para ayudar al desarrollo de un método CEX para el análisis del perfil de variantes de carga de un candidato de mAb. El desarrollo del método analítico tenía como objetivo proporcionar un método CEX de alto rendimiento (HT) para respaldar el análisis de variantes de carga con requisitos mínimos de muestra y tiempo. El enfoque split-DoE se basa en el conocimiento fundamental del mecanismo de separación CEX y tiene como objetivo reducir la cantidad de ejecuciones experimentales mientras se explora un amplio espacio experimental. Se utilizó un modelo de regresión para estudiar el efecto de los parámetros de proceso individuales y sus interacciones en la eficiencia de separación para finalmente identificar las condiciones óptimas del método. Este estudio proporciona un flujo de trabajo eficiente para aprovechar el desarrollo de métodos CEX.
Re: Desarrollo de métodos asistidos por DoE para el análisis de variantes de carga de anticuerpos monoclonales mediante cromatografía de intercambio catiónicoHola Víctor,
Tiene razón, el cubo representa un diseño Behnken de caja (BBD), mientras que el experimento para la primera molécula que se informa en las diapositivas se realizó en un diseño compuesto central (CCD). ¡Gracias por detectarlo y disculpas por el error tipográfico! BBD se utilizó para optimizar los métodos CEX para otras moléculas con una zona de operación más estrecha para los mismos factores experimentales. El enfoque de división dividida para el desarrollo del método CEX utilizando un BBD o CCD en el segundo paso se utilizó para las moléculas de las que se informan las trazas de CEX en la diapositiva 9. CCD superior usado y BBD inferior usado como segundo DoE. Espero que esto responda a su pregunta y disculpe las diapositivas confusas.
Re: Desarrollo de métodos asistidos por DoE para el análisis de variantes de carga de anticuerpos monoclonales mediante cromatografía de intercambio catiónicoHola @jlmbs ,
¡Muchas gracias por compartir su interesante caso de uso!
Puede que me esté equivocando, pero creo que el diseño que se muestra en Diseño compuesto central (páginas 5 y 8) se parece más a un diseño de Box Benhken con un punto central.
Un CCD se vería así: https://www.researchgate.net/profile/Harald-Hetzner/publication/275971176/figure/fig1/AS:614298875359234@1523471673216/Schema-of-a-central-composite-design-with-three-factors-AB- y-C-consiste-en-un.png
En su estudio, ¿usó un CCD (a través del aumento del diseño de detección de efectos principales) o un "nuevo" diseño de Box Benhken?
Muchas gracias por tu respuesta,
