양이온 교환 크로마토그래피에 의한 단클론 항체 전하 변이체 분석을 위한 DoE 지원 방법 개발양이온 교환 크로마토그래피(CEX)는 단클론 항체(mAbs)와 같은 생물약제 전하 변이체 분석을 위한 업계 표준입니다. 그러나 시간과 자원 효율적인 방식으로 CEX 방법을 개발하면 단백질 특성화에 병목 현상이 발생합니다. CEX 분리는 복잡하며 컬럼 화학, 구배 유형, 유속, 이동상 구성 및 pH와 같은 여러 요인에 의해 좌우됩니다. 몇몇 과학 간행물은 크로마토그래피 방법 개발에서 실험 설계(DoE)의 성공적인 적용을 입증했습니다. 그럼에도 불구하고 많은 요소로 DoE를 수행하는 것은 어렵고 시간과 비용이 많이 소요될 수 있습니다. 이 작업은 mAb 후보의 전하 변이체 프로파일 분석을 위한 CEX 방법의 개발을 지원하기 위해 분할 DoE 접근 방식의 사용을 보여줍니다. 분석 방법 개발은 최소한의 샘플 및 시간 요구 사항으로 전하 변이체 분석을 지원하는 고처리량(HT) CEX 방법을 제공하기 위한 것입니다. 분할 DoE 접근 방식은 CEX 분리 메커니즘에 대한 기본 지식을 기반으로 하며 넓은 실험 공간을 탐색하면서 실험 실행 수를 줄이는 것을 목표로 합니다. 회귀 모델링을 사용하여 개별 공정 매개변수와 분리 효율에 대한 상호 작용의 영향을 연구하여 궁극적으로 최적의 방법 조건을 식별했습니다. 이 연구는 CEX 방법의 개발을 활용하기 위한 효율적인 작업 흐름을 제공합니다.
Re: 양이온 교환 크로마토그래피를 통한 단클론 항체 전하 변이체 분석을 위한 DoE 지원 방법 개발안녕 빅터,
맞습니다. 큐브는 상자 Behnken 디자인(BBD)을 나타내고 슬라이드에 보고된 첫 번째 분자에 대한 실험은 CCD(중심 복합 디자인)에서 수행되었습니다. 찾아주셔서 감사하고 오타에 대해 사과드립니다! BBD는 동일한 실험 요인에 대해 더 좁은 작동 영역을 가진 다른 분자에 대한 CEX 방법을 최적화하는 데 사용되었습니다. 두 번째 단계에서 BBD 또는 CCD를 사용하는 CEX 분석법 개발을 위한 split-doe 접근법은 CEX 추적이 슬라이드 9에 보고된 분자에 사용되었습니다. 상단은 CCD를 사용했고 하단은 BBD를 두 번째 DoE로 사용했습니다. 혼란스러운 슬라이드 데크에 대한 귀하의 질문과 사과에 대한 답변이 되었기를 바랍니다.
Re: 양이온 교환 크로마토그래피를 통한 단클론 항체 전하 변이체 분석을 위한 DoE 지원 방법 개발안녕 @jlmbs ,
흥미로운 사용 사례를 공유해 주셔서 감사합니다!
착각일 수도 있지만 Central Composite Design(5, 8페이지) 아래에 표시된 디자인인 것 같습니다. 중심점이 있는 Box Benhken 디자인처럼 보입니다.
CCD는 다음과 같습니다. https://www.researchgate.net/profile/Harald-Hetzner/publication/275971176/figure/fig1/AS:614298875359234@1523471673216/Schema-of-a-central-composite-design-with-three-factors-AB- and-C-It-consists-of-a.png
귀하의 연구에서 CCD(주요 효과 선별 디자인의 확대를 통해) 또는 "새로운" Box Benhken 디자인을 사용했습니까?
귀하의 답변에 감사드립니다.
