DoE-unterstützte Methodenentwicklung zur Analyse von Ladungsvarianten monoklonaler Antikörper mittels KationenaustauschchromatographieDie Kationenaustauschchromatographie (CEX) ist der Goldstandard der Branche für die Analyse von Ladungsvarianten von Biopharmazeutika wie monoklonalen Antikörpern (mAbs). Allerdings stellt die zeit- und ressourceneffiziente Entwicklung von CEX-Methoden einen Engpass bei der Proteincharakterisierung dar. CEX-Trennungen sind komplex und werden von mehreren Faktoren wie Säulenchemie, Gradiententyp, Flussrate, Zusammensetzung der mobilen Phase und pH-Wert bestimmt. Mehrere wissenschaftliche Veröffentlichungen haben die erfolgreiche Anwendung von Design-of-Experiment (DoE) bei der Entwicklung von Chromatographiemethoden nachgewiesen. Dennoch kann die Durchführung von DoEs mit einer großen Anzahl von Faktoren herausfordernd, zeitaufwändig und teuer sein. Diese Arbeit veranschaulicht die Verwendung eines Split-DoE-Ansatzes zur Unterstützung der Entwicklung einer CEX-Methode zur Analyse des Ladungsvariantenprofils eines mAb-Kandidaten. Die Entwicklung der Analysemethode sollte eine CEX-Methode mit hohem Durchsatz (HT) bereitstellen, um die Analyse von Ladungsvarianten mit minimalem Proben- und Zeitaufwand zu unterstützen. Der Split-DoE-Ansatz basiert auf grundlegendem Wissen über den CEX-Trennmechanismus und zielt darauf ab, die Anzahl der Versuchsläufe zu reduzieren und gleichzeitig einen großen Versuchsraum zu erkunden. Mittels Regressionsmodellierung wurde der Einfluss sowohl einzelner Prozessparameter als auch deren Wechselwirkungen auf die Trenneffizienz untersucht, um letztendlich die optimalen Methodenbedingungen zu ermitteln. Diese Studie bietet einen effizienten Arbeitsablauf für die Nutzung der Entwicklung von CEX-Methoden.
Betreff: DoE-unterstützte Methodenentwicklung zur Analyse von Ladungsvarianten monoklonaler Antikörper mittels KationenaustauschchromatographieHallo Victor,
Sie haben Recht, der Würfel stellt ein Box-Behnken-Design (BBD) dar, während das Experiment für das erste auf den Folien beschriebene Molekül auf einem zentralen Verbunddesign (CCD) durchgeführt wurde. Vielen Dank, dass Sie es entdeckt haben, und entschuldigen Sie den Tippfehler! BBD wurde zur Optimierung von CEX-Methoden für andere Moleküle mit engerer Betriebszone für dieselben experimentellen Faktoren verwendet. Der Split-Doe-Ansatz für die Entwicklung der CEX-Methode unter Verwendung eines BBD oder CCD im zweiten Schritt wurde für die Moleküle verwendet, deren CEX-Spuren auf Folie 9 aufgeführt sind. Oben verwendetes CCD und unten verwendetes BBD als zweites DoE. Ich hoffe, dass dies Ihre Frage beantwortet und entschuldige mich für die verwirrende Präsentation.
Betreff: DoE-unterstützte Methodenentwicklung zur Analyse von Ladungsvarianten monoklonaler Antikörper mittels KationenaustauschchromatographieHallo @jlmbs ,
Vielen Dank, dass Sie Ihren interessanten Anwendungsfall geteilt haben!
Vielleicht irre ich mich, aber ich denke, dass das unter Central Composite Design (Seiten 5 und 8) gezeigte Design sieht eher aus wie ein Box Benhken-Design mit einem Mittelpunkt.
Ein CCD würde so aussehen: https://www.researchgate.net/profile/Harald-Hetzner/publication/275971176/figure/fig1/AS:614298875359234@1523471673216/Schema-of-a-central-composite-design-with- three-factors-AB- and-C-It-consists-of-a.png
Haben Sie in Ihrer Studie ein CCD (durch Erweiterung des Main Effects Screening-Designs) oder ein „neues“ Box Benhken-Design verwendet?
Vielen Dank für Ihre Antwort,
