Développement de méthodes assistées par le DoE pour l'analyse des variants de charge d'anticorps monoclonaux par chromatographie d'échange de cationsLa chromatographie d'échange de cations (CEX) est l'étalon-or de l'industrie pour l'analyse des variants de charge biopharmaceutiques tels que les anticorps monoclonaux (mAbs). Cependant, le développement de méthodes CEX d'une manière économe en temps et en ressources constitue un goulot d'étranglement dans la caractérisation des protéines. Les séparations CEX sont complexes et régies par de multiples facteurs tels que la chimie de la colonne, le type de gradient, le débit, la composition de la phase mobile et le pH. Plusieurs publications scientifiques ont prouvé l'application réussie de la conception d'expériences (DoE) dans le développement de méthodes de chromatographie. Néanmoins, effectuer des DoE avec un grand nombre de facteurs peut être difficile, long et coûteux. Ce travail illustre l'utilisation d'une approche split-DoE pour aider au développement d'une méthode CEX pour l'analyse du profil de variantes de charge d'un candidat mAb. Le développement de la méthode analytique visait à fournir une méthode CEX à haut débit (HT) pour prendre en charge l'analyse des variantes de charge avec des exigences minimales en matière d'échantillon et de temps. L'approche split-DoE est basée sur la connaissance fondamentale du mécanisme de séparation CEX et vise à réduire le nombre d'essais expérimentaux tout en explorant un large espace expérimental. La modélisation de régression a été utilisée pour étudier l'effet des paramètres de processus individuels et de leurs interactions sur l'efficacité de la séparation pour finalement identifier les conditions optimales de la méthode. Cette étude fournit un flux de travail efficace pour tirer parti du développement des méthodes CEX.
Objet : Développement de méthodes assistées par le DoE pour l'analyse des variantes de charge d'anticorps monoclonaux par chromatographie d'échange de cationsSalut Viktor,
Vous avez raison, le cube représente un plan de Behnken en boîte (BBD) alors que l'expérience pour la première molécule rapportée dans les diapositives a été réalisée sur un plan composite central (CCD). Merci de l'avoir repéré et désolé pour la faute de frappe ! BBD a été utilisé pour optimiser les méthodes CEX pour d'autres molécules avec une zone de fonctionnement plus étroite pour les mêmes facteurs expérimentaux. L'approche split-doe pour le développement de la méthode CEX utilisant un BBD ou un CCD dans la deuxième étape a été utilisée pour les molécules dont les traces CEX sont rapportées dans la diapositive 9. Le haut a utilisé le CCD et le bas a utilisé le BBD comme deuxième DoE. J'espère que cela répond à votre question et je m'excuse pour le jeu de diapositives déroutant.
Objet : Développement de méthodes assistées par le DoE pour l'analyse des variantes de charge d'anticorps monoclonaux par chromatographie d'échange de cationsSalut @jlmbs ,
Merci beaucoup pour le partage de votre cas d'utilisation intéressant !
Je me trompe peut-être, mais je pense que la conception présentée sous Central Composite Design (pages 5 et 8) ressemble plus à un design Box Benhken avec un point central.
Un CCD ressemblerait à ceci : https://www.researchgate.net/profile/Harald-Hetzner/publication/275971176/figure/fig1/AS:614298875359234@1523471673216/Schema-of-a-central-composite-design-with-three-factors-AB- et-C-Il-consiste-en-un.png
Dans votre étude, avez-vous utilisé un CCD (grâce à l'augmentation du design du Main Effects Screening) ou un "nouveau" design Box Benhken ?
Merci beaucoup pour votre réponse,
