La chromatographie d'échange de cations (CEX) est l'étalon-or de l'industrie pour l'analyse des variants de charge biopharmaceutiques tels que les anticorps monoclonaux (mAbs). Cependant, le développement de méthodes CEX d'une manière économe en temps et en ressources constitue un goulot d'étranglement dans la caractérisation des protéines. Les séparations CEX sont complexes et régies par de multiples facteurs tels que la chimie de la colonne, le type de gradient, le débit, la composition de la phase mobile et le pH. Plusieurs publications scientifiques ont prouvé l'application réussie de la conception d'expériences (DoE) dans le développement de méthodes de chromatographie. Néanmoins, effectuer des DoE avec un grand nombre de facteurs peut être difficile, long et coûteux. Ce travail illustre l'utilisation d'une approche split-DoE pour faciliter le développement d'une méthode CEX pour l'analyse du profil de variantes de charge d'un candidat mAb. Le développement de la méthode analytique visait à fournir une méthode CEX à haut débit (HT) pour prendre en charge l'analyse des variantes de charge avec des exigences minimales en matière d'échantillon et de temps. L'approche split-DoE est basée sur la connaissance fondamentale du mécanisme de séparation CEX et vise à réduire le nombre d'essais expérimentaux tout en explorant un large espace expérimental. La modélisation par régression a été utilisée pour étudier l'effet des paramètres de processus individuels et de leurs interactions sur l'efficacité de la séparation pour finalement identifier les conditions optimales de la méthode. Cette étude fournit un flux de travail efficace pour tirer parti du développement des méthodes CEX.
