Ciao a tutti.
Innanzitutto voglio ringraziare il comitato del Discovery Summit
per avermi dato la possibilità di presentarvi il lavoro
ci esibiamo nella mia squadra sul
implementazione di una piattaforma di progettazione a trama divisa
per studiare la purificazione dei nostri eccipienti innovativi.
Innanzitutto ADOCIA è una società di biotecnologie fondata nel 2005
da Gérard Soula e i suoi due figli, e la nostra sede è a Lione, in Francia.
La nostra missione è sviluppare formulazioni innovative approvate
ormoni per il trattamento del diabete e dell’obesità.
Il modello di business è un prodotto in licenza dopo il concetto approvato.
E attualmente nella nostra pipeline abbiamo tre piattaforme tecnologiche brevettate.
E un prodotto approvato per entrare nella fase tre in Cina.
Cinque prodotti con prova clinica di concetto,
e sei progetti che rappresentano la fase preclinica.
Siamo circa 115 persone in ADOCIA e l'80% è dedicato alla ricerca e sviluppo.
Parlando delle piattaforme tecnologiche.
Oggi
parleremo di quella storica, ovvero la piattaforma BioChaperone.
Il BioChaperone è un eccipiente farmaceutico
uno organico sintetico,
e formerà un complesso con una proteina come l'insulina, l'amilina o il glucagone.
Questo complesso ispirato alla natura migliorerà la solubilità o la stabilità,
accelerare l'assorbimento del peptide
o proteggerlo dalla degradazione enzimatica.
La piattaforma BioChaperone si potenzia
le prestazioni dell’insulina e di altri ormoni.
E oggi cinque dei prodotti proprietari basati su BioChaperone
sono in fase di sviluppo clinico.
Lo sviluppo della chimica del BioChaperone
Penso che sia lo stesso in molte aziende farmaceutiche.
Partiremo da una fase iniziale del processo
che consegnerà lotti di pochi grammi
che entreranno in studi preclinici come quelli sull’efficacia tossicologica.
E una volta che BioChaperone è stato concepito come protagonista
arriverà nel mio dipartimento, nella mia squadra,
sviluppare un processo finale per consegnare i lotti della fase tre.
E alla fine i lotti commerciali ammontano a poche centinaia di chili all'anno.
I cambiamenti che dovremo affrontare sono imposti dalla fattibilità su larga scala
e saremo guidati dai costi e dalle prestazioni
e molti cambiamenti saranno subiti.
Bisogna quindi capirli e documentarli.
L’obiettivo del nostro lavoro è avere una comprensione completa
del rapporto tra parametro di variazione
e il loro impatto sulla qualità del prodotto.
In effetti, poiché opereremo su larga scala, conosciamo quella temperatura
non si può puntare a 10,0 gradi ogni volta,
possono essere 11, possono essere nove.
Ciò è sofferto a causa della larga scala.
Parleremo di robustezza,
che il processo deve assorbire questa variabilità intrinseca in un intervallo definito.
E dobbiamo conoscere il suo impatto sulla qualità del prodotto.
In questa fase passeremo dalla riproducibilità nella fase iniziale,
alla robustezza su larga scala e nella fase finale del processo.
Per farlo abbiamo gli strumenti.
Due di questi sono l'analisi dei rischi che ci aiuterà a stabilire le priorità,
per classificare il lavoro.
E i DoE sono molto utili perché lo sappiamo in chimica
abbiamo molte interazioni tra i parametri,
quindi questo è molto utile per noi.
Oggi parleremo della purificazione degli eccipienti.
Questa purificazione viene effettuata mediante diafiltrazione.
Una rapida panoramica del processo è quella della materia prima
entra in una trasformazione chimica,
che darà un eccipiente grezzo in soluzione.
Questo eccipiente grezzo in soluzione verrà purificato mediante diafiltrazione
dare l'eccipiente puro in soluzione.
Cos'è la diafiltrazione?
Abbiamo innanzitutto le filtrazioni classiche
questa è chiamata la filtrazione senza uscita in cui abbiamo un solido
O
quello in eccipiente in una soluzione e una membrana.
la soluzione risalirà con la pressione verso il basso per recuperare il solido
sulla faccia superiore della membrana.
Abbiamo una filtrazione a flusso incrociato
il retentato che viene portato parallelamente alla membrana mediante una pompa.
E applicheremo una pressione utilizzando valvole che spingeranno fuori una parte del flusso
attraverso la membrana, quel processo definisce i pori e lascia solo
piccole molecole di attraversare la membrana.
E abbiamo le grandi molecole che rimarranno nel retentato.
E usiamo questa tecnologia perché sappiamo che il nostro eccipiente
sono oligomeri, il che significa che non sono piccole molecole.
Non sono polimeri, sono tra le due dimensioni,
ma sono abbastanza grandi e rimarranno nel retentato.
Una rapida panoramica dell'unità.
Abbiamo il retentato.
Un vaso con il retentato che verrà portato attraverso la membrana
l'utilizzo di una pompa di alimentazione e di una valvola di contropressione ci consentirà di farlo
hanno una pressione nella membrana e spingono attraverso una parte del flusso nel permeato
ciò eliminerà le piccole impurità molecolari.
A destra hai la scala da 50 litri
pilota di diafiltrazione che utilizziamo in ADOCIA sul retro, il recipiente da 50 litri.
In alto a sinistra abbiamo l'alloggiamento con la membrana e tutti i tubi utilizzati
con valvole e strumenti per monitorare il processo di lavoro.
Per il nostro studio abbiamo solo una massa che possiamo utilizzare.
Una massa di soluzione grezza di eccipiente.
L'idea era di avere una circolazione a flusso
del flusso, il che significa che il permeato viene ogni volta riportato allo stato retantato
in questo modo avremo un retentato rappresentativo del processo.
All'inizio di ogni evento del DoE.
Per una filtrazione a secco abbiamo fattori determinanti
molto presto nel processo, che è il riferimento della membrana,
il che significa che la dimensione limite del poro e il materiale delle costrizioni.
Una volta impostato, è impostato e non lo cambieremo.
E il caricamento, ovvero il
chilogrammi di eccipiente per superficie di membrana, vengono definiti superficie membrana
e il chilogrammo di eccipiente è definito dal processo.
Quando è pronto, è pronto. Non lo cambieremo.
Ciò che possiamo ottimizzare come fattore RDSA.
La concentrazione del BioChaperone nelle soluzioni che dobbiamo purificare,
il flusso di alimentazione, che è il flusso imposto dalla pompa di alimentazione.
La pressione transmembranare, che è un modo per controllare la pressione che si verifica
spingere il permeato attraverso la membrana e la temperatura della soluzione.
Dalle risposte possiamo osservare quali sono le perdite attraverso la membrana che si verificheranno
incidono sulla resa del processo, sulle impurità che lo attraversano
la membrana presente nel permeato che influirà sulla qualità
del prodotto, che è la parte più importante di questo lavoro.
E la portata del permeato che avrà un impatto sul tempo.
Fornirà informazioni sull'intero tempo del processo su larga scala.
L'obiettivo dello studio era definire lo spazio di progettazione che è uno spazio multivariato
che garantisce la conformità delle risposte,
Qui è la qualità del prodotto.
E opteremo per un tipo di progetto che sia un modello di superficie di risposta.
Il primo tentativo che abbiamo eseguito. Abbiamo eseguito il progetto Box-Behnken.
Per eseguire un progetto Box-Behnken si passa al design classico della superficie di risposta DoE.
Caricherò la risposta.
Eseguine uno
risposta e la caricherò
i fattori.
Un fattore.
Va bene.
SÌ. Ecco le tre risposte.
Parlo delle perdite precedenti, dell'eliminazione,
l'eliminazione delle impurità e il flusso del permeato.
E abbiamo i quattro fattori che sono la temperatura,
pressione, concentrazione o analisi e flusso di alimentazione.
Box-Behnken è la prima proposta di questo box.
Continueremo a realizzare la tabella.
E abbiamo la tabella Box-Behnken standard con esecuzione randomizzata, come puoi vedere.
Abbiamo iniziato a eseguire questo DoE e dopo una prova era chiaro che non lo avremmo fatto
in grado di eseguire questo DOE in ordine casuale perché non possiamo
concentrare o diluire la maggior parte tra ciascuno di essi.
Se concentriamo la maggior parte attraverso la membrana
è perfettamente fattibile ma perderemo alcune impurità.
La nostra massa non è più rappresentativa del processo a monte.
Non è una soluzione.
Possiamo distillare la maggior parte ma ci vorrà molto tempo perché è acqua.
E il secondo parametro che non sarà facile da modificare tra ciascun fattore è
la temperatura dovuta al ricircolo impiega molto tempo per stabilizzarsi
la temperatura tra ogni corsa quando dobbiamo cambiarla.
Abbiamo fatto qualcosa che farà urlare alcune persone tra il pubblico.
Ma abbiamo ordinato il test in base alla temperatura.
E mediante analisi.
Lasciami solo
aggiungi un po' di colore per avere una visione migliore.
Colore del valore.
Questo è quello che abbiamo fatto.
Abbiamo dei test che sono in blocco con 90
poi il blocco da 60 e il blocco da 30 e in ciascun blocco del test
abbiamo una temperatura che ha ordinato 40, 30, 20 ecc.
Abbiamo gestito questo DoE in questo modo.
Ecco i dati che otteniamo.
Noi possiamo
analizzarlo utilizzando la piattaforma del modello di adattamento con i quattro
fattori e esamineremo le perdite e correremo.
Abbiamo un modello abbastanza buono per le perdite.
Va bene, abbiamo un buon PValue, lo abbiamo
parametri. Va bene.
Ma il fatto è
siamo rimasti piuttosto delusi
dall'approccio statistico perché sappiamo che il primo
La regola è randomizzare l'esecuzione per avere una buona stima dell'errore.
Non è stato soddisfacente.
Siamo tornati ai nostri studi, direi e solo per ricordarlo
la situazione era che non possiamo utilizzare un nuovo lotto tra ciascuno di essi.
Sarà necessario troppo volume e non ce l'abbiamo.
Non è possibile modificare il dosaggio in massa
ciascuno a causa della rappresentatività della massa e della temperatura non può esserlo
cambiato facilmente perché richiederebbe davvero molto tempo.
Guardiamo i libri e alla fine di molti
libri abbiamo trovato una soluzione che è la progettazione della trama divisa.
Il design a trama divisa è stato introdotto dal settore agricolo perché lo ha fatto
in genere devono cambiare fattori come i campi agricoli.
Diciamo che vuoi studiare
i diversi trattamenti
su diversi cereali o colture e non hai spazio su un campo.
Avremo molti campi e questi campi sono diversi.
Ma questa non è la cosa che vuoi studiare.
L'idea alla base della progettazione della trama divisa è quella di avere un'intera trama riempita
con quello verranno analizzati come blocchi casuali.
E poi su ogni appezzamento intero applicherai il trattamento o la coltura uno, due, tre, quattro
e lo studierai all'interno dell'intera trama e si chiamano sottotrame.
Come è fatto su JMP.
Lo chiuderò.
Questo.
Questo.
E questo.
Per eseguire un progetto a trama divisa devi andare sul design personalizzato della piattaforma DoE.
Caricherò le risposte per la seconda esecuzione.
Aprire.
E i fattori.
Quello che vediamo qui.
Scusa.
Vediamo la temperatura del test dei nostri quattro fattori,
CFF è il flusso di alimentazione e la pressione.
E abbiamo una colonna aggiuntiva che riguarda i cambiamenti di nome.
E puoi sintonizzare il fatto se è difficile,
molto difficile da cambiare o facile da cambiare.
Molto difficile da modificare è la concentrazione o il dosaggio.
Il fattore difficile da cambiare è la temperatura perché possiamo cambiarla
ma non entriamo nel blocco del test.
E i fattori facili
sono gli altri due fattori che possono essere randomizzati tra le esecuzioni.
Vogliamo optare per il modello di risposta superficiale.
Se fai clic su RSM qui inseriamo sei interi appezzamenti e 12 interi appezzamenti.
Abbiamo 36 corse e realizziamo il design.
Ci vorranno alcuni secondi per realizzare il disegno.
Giusto per ricordartelo per il Box-Behnken DoE.
Sono state 27 le corse.
Abbiamo molte più prove su questo DoE.
Realizzerò la tavola e per quanto riguarda il Box-Behnken aggiungerò dei colori.
Colonna.
Cosa ho fatto. Scusa, rifaccio la tabella.
SÌ.
Ok scusa. SÌ.
Va bene.
Vedi che abbiamo dei test che lo sono
disporre i blocchi e corrisponde a tutti i blocchi uno, due, tre, quattro
ecc. e in ciascuno
blocco del test ci sono blocchi di temperatura che sono le sottotrame
uno, due, tre, quattro ecc.
E CFF e TMP sono randomizzati all'interno di questi due blocchi.
Eseguiamo questi dati DOE e puoi scegliere il modello.
Qui vediamo le differenze tra l'analisi tra standard
Box-Behnken DoE e progettazione a trama divisa.
Abbiamo tutte le trame che vengono aggiunte
negli effetti e vengono trattati come blocchi casuali e abbiamo tutti gli altri
parametri ed effetti.
E qui abbiamo il metodo che è il metodo di analisi REML.
Corriamo
il DoE.
Se ci concentriamo sulla risposta delle perdite vediamo che abbiamo
un modello molto buono con il 96% della variazione spiegata da questo modello.
Vediamo che abbiamo
effetti significativi.
E
la casella aggiuntiva che dobbiamo considerare con questa analisi è la varianza REML
stime dei componenti che ci daranno un'idea del conto introdotto
dai blocchi, dall'intero grafico e vediamo che il PValue non è significativo.
Possiamo andare oltre.
Non ci sono problemi con i blocchi così tali
come gli altri DOE
eseguendo JMP possiamo andare
e avere un profilo da ottimizzare per definire gamme e spazi di progettazione.
Qui lo vediamo
il test è il fattore più influenzato
su ogni risposta e perdita c'è la risposta che viene influenzata da tutti
i quattro parametri dei fattori e possiamo vedere
che con i parametri che usiamo come target siamo abbastanza bravi con l'ottimizzazione.
Ciò che potrebbe essere interessante è guardare questo modello, questo DoE utilizzando uno standard
analisi.
Tolgo tutto.
Prenderò i quattro
fattore.
Tutto questo.
Per analisi standard.
Lo eseguo.
Qui.
Torno sotto le perdite e la risposta.
Va bene.
Qui guarderò
le perdite.
Quello che possiamo vedere
è che non abbiamo esattamente lo stesso ordine
per i parametri, effetto o stima.
Nell'analisi standard possiamo dire che il dosaggio è il fattore più influente
mentre nel disegno spettrale c'è il flusso, il dosaggio è il quinto
ed è abbastanza normale
perché quando usiamo i blocchi e facciamo l'analisi standard daremo di più
forza a questi blocchi e commetteremo errori su di essi
e lo definiremo impattante ma non lo è.
Questo è perfettamente normale.
Questo è il motivo per cui devi farlo
un'analisi utilizzando REML e blocchi per avere il giusto ordine di fattori di impatto.
In conclusione di questo studio.
In questo caso di studio è consentita la progettazione a trama divisa
procedere indipendentemente dalla non randomizzazione di alcuni parametri.
Siamo stati in grado di eseguire l'intero DoE in un arco di tempo più breve.
Anche se sono state necessarie 36 corse contro 27.
Ma poiché non abbiamo bisogno di concentrarci
per stabilizzare il plotter tra ogni esecuzione è stato molto più breve.
E sapremo giustificarci adeguatamente
lo spazio di progettazione con una forte evidenza statistica.
Vale la pena notare che il design della trama è diviso
la piattaforma è ora implementata per sviluppare e ottimizzare rapidamente la nostra piattaforma proprietaria
purificazioni degli eccipienti e come messaggi take away.
Fai solo attenzione alla randomizzazione dei fattori.
Sappiamo che è la prima regola per eseguire un DOE, ma è molto importante averne uno corretto
design che ti permetterà di avere una statistica
conoscenza del processo e una corretta
la progettazione potrebbe consentire di risparmiare tempo anche se sono necessarie più tirature.
Grazie per l'attenzione.
