Salve a tutti.
Prima di tutto voglio ringraziare il comitato del Discovery Summit
per avermi dato la possibilità di presentarvi l'opera
ci esibiamo nella mia squadra sul
implementazione di una piattaforma di progettazione split-plot
per studiare la purificazione dei nostri innovativi eccipienti.
Innanzitutto, ADOCIA è una società di biotecnologie fondata nel 2005
di Gérard Soula e dei suoi due figli, e ci troviamo a Lione, in Francia.
La nostra missione è sviluppare una formulazione innovativa di approvato
ormoni per il trattamento del diabete e dell'obesità.
Il modello di business è prodotto in licenza dopo il concept approvato.
E attualmente nella nostra pipeline abbiamo tre piattaforme tecnologiche brevettate.
E un prodotto approvato per entrare nella fase tre in Cina.
Cinque prodotti con proof of concept clinico,
e sei progetti che sono la fase preclinica.
Siamo circa 115 persone in ADOCIA e l'80% si dedica alla ricerca e sviluppo.
Parliamo delle piattaforme tecnologiche.
In data odierna
parleremo di quella storica, che è la piattaforma BioChaperone.
Il BioChaperone è un eccipiente farmaceutico
una sintetica organica,
e formerà un complesso con una proteina come l'insulina o l'amilina o il glucagone.
Questo complesso ispirato alla natura migliorerà la solubilità o stabilità,
accelerare l'assorbimento del peptide
o proteggerlo dalla degradazione enzimatica.
La piattaforma BioChaperone si potenzia
le prestazioni di insuline e altri ormoni.
E oggi cinque di prodotti proprietari basati su BioChaperone
sono in fase di sviluppo clinico.
Lo sviluppo della chimica del BioChaperone
Penso che sia lo stesso in molte aziende farmaceutiche.
Andremo da un processo in fase iniziale
che consegnerà lotti di pochi grammi
che entreranno in studi preclinici come l'efficacia tossicologica.
E una volta che BioChaperone è stato progettato come protagonista
arriverà nel mio dipartimento, nella mia squadra,
sviluppare un processo finale per consegnare i lotti della fase tre.
E alla fine i lotti commerciali variano a poche centinaia di chili all'anno.
I cambiamenti che dovremo affrontare sono imposti dalla fattibilità su larga scala
e saremo guidati da costi e prestazioni
e molti cambiamenti saranno subiti.
Quindi dobbiamo capirli e documentarli.
L'obiettivo del nostro lavoro è avere una comprensione completa
della relazione tra parametro di variazione
e il loro impatto sulla qualità del prodotto.
Infatti, poiché ci esibiremo su larga scala, conosciamo quella temperatura
non può essere mirato a 10,0 gradi ogni volta,
può essere 11, può essere nove.
Ciò è sofferto a causa della grande scala.
Parleremo di robustezza,
che il processo deve assorbire questa variabilità intrinseca in un intervallo definito.
E dobbiamo conoscere il suo impatto sulla qualità del prodotto.
In questa fase si passerà dalla riproducibilità in fase iniziale,
alla robustezza su larga scala e alla fase finale del processo.
Per farlo abbiamo gli strumenti.
Due di questi sono l'analisi del rischio che ci aiuterà a stabilire le priorità,
per classificare il lavoro.
E DoE sono molto utili perché lo sappiamo in chimica
abbiamo molte interazioni tra parametri,
quindi questo è molto utile per noi.
Oggi parleremo della purificazione degli eccipienti.
Questa purificazione avviene per diafiltrazione.
Una rapida panoramica del processo è quella materia prima
entra in una trasformazione chimica,
che darà un eccipiente grezzo in soluzione.
Questo eccipiente grezzo in soluzione sarà purificato mediante diafiltrazione
dare l'eccipiente puro in soluzione.
Cos'è la diafiltrazione?
Abbiamo in primis le filtrazioni classiche
quella è chiamata la filtrazione senza uscita in cui abbiamo un solido
o
che in eccipiente in una soluzione e una membrana.
la soluzione arriverà fino in fondo con la pressione per recuperare il solido
sulla faccia superiore della membrana.
Abbiamo una filtrazione a flusso incrociato
il retentato che viene portato in parallelo alla membrana mediante una pompa.
E applicheremo una pressione usando valvole che spingeranno una parte del flusso ad andare
attraverso la membrana, quel processo ha definito i pori e lascia solo
piccole molecole per passare attraverso la membrana.
E abbiamo le grandi molecole che rimarranno nel retentato.
E usiamo questa tecnologia perché sappiamo che il nostro eccipiente
sono oligomeri, il che significa che non sono piccole molecole.
Non sono polimeri, sono tra le due dimensioni,
ma sono abbastanza grandi e rimarranno nella retentata.
Una rapida panoramica dell'unità.
Abbiamo il ritenuto.
Un recipiente con il retentato che verrà portato attraverso la membrana
ci consentirà di utilizzare una pompa di alimentazione e una valvola di contropressione
avere una pressione nella membrana e spingere attraverso una parte del flusso nel permeato
che eliminerà le impurità della piccola molecola.
Sulla destra hai la bilancia da 50 litri
pilota di diafiltrazione che utilizziamo in ADOCIA sul retro, il vaso da 50 litri.
In alto a sinistra abbiamo la custodia con la membrana e tutti i tubi utilizzati
con valvole e strumenti per monitorare il processo di lavoro.
Per il nostro studio abbiamo solo una massa che possiamo usare.
Una massa di soluzione di eccipiente grezzo.
L'idea era quella di avere un flusso di circolazione
del flusso significa che il permeato viene riportato a ritrattare ogni volta
in questo modo avremo un ritenuto che è rappresentativo del processo.
All'inizio di ogni evento del DoE.
Per una filtrazione a secco abbiamo dei fattori determinanti
molto presto nel processo, che è la membrana di riferimento,
il che significa che la dimensione del taglio dei pori e il materiale delle costrizioni.
Una volta impostato, è impostato e non lo cambieremo.
E il caricamento, ovvero il
chilogrammi di eccipiente per superficie della membrana, la membrana è definita superficie
e il chilogrammo di eccipiente è definito dal processo.
Quando è impostato, è impostato. Non lo cambieremo.
Cosa possiamo sintonizzare come fattore RDSA.
La concentrazione del BioChaperone nelle soluzioni che dobbiamo purificare,
il flusso di alimentazione, che è il flusso imposto dalla pompa di alimentazione.
La pressione transmembranare, che è un modo per controllare la pressione che lo farà
spingere il permeato attraverso la membrana e la temperatura della soluzione.
Le risposte che possiamo guardare sono le perdite attraverso la membrana che lo farà
influiscono sulla resa del processo, sulle impurità che lo attraversa
la membrana che si trova nel permeato che influirà sulla qualità
del prodotto, che è la parte più importante di questo lavoro.
E permea la portata che influirà sul tempo.
Fornirà informazioni dettagliate sull'intero tempo di processo su larga scala.
L'obiettivo dello studio era definire lo spazio progettuale che è uno spazio multivariato
che garantisce la conformità delle risposte,
Qui è la qualità del prodotto.
E sceglieremo un tipo di progetto che sia un modello di superficie di risposta.
Il primo tentativo che abbiamo eseguito. Abbiamo eseguito il design Box-Behnken.
Per eseguire un progetto Box-Behnken, vai sul classico design della superficie di risposta DoE.
Caricherò la risposta.
Esegui uno
risposta e caricherò
i fattori.
Uno dei fattori.
Bene.
Sì. Ecco le tre risposte.
Parlo di perdite precedenti, l'eliminazione,
l'eliminazione delle impurità e il flusso del permeato.
E abbiamo i quattro fattori che sono la temperatura,
pressione, concentrazione o dosaggio e flusso di alimentazione.
Box-Behnken è la prima proposta in questo box.
Continueremo a fare la tavola.
E abbiamo la tabella Box-Behnken standard con corsa randomizzata come puoi vedere.
Abbiamo iniziato a gestire questo DoE e dopo una prova è stato chiaro che non lo saremo
in grado di eseguire questo DOE in un ordine casuale perché non possiamo
concentrare o diluire la maggior parte tra ciascuno.
Se concentriamo il grosso attraverso la membrana
è perfettamente fattibile ma perderemo alcune impurità.
Il nostro grosso non è più rappresentativo del processo a monte.
Non è una soluzione.
Possiamo distillare la maggior parte ma ci vorrà molto tempo perché è acqua.
E il secondo parametro che non sarà facile cambiare tra ogni fattore è
la temperatura dovuta al ricircolo è piuttosto più lunga per stabilizzarsi
la temperatura tra ogni corsa quando dobbiamo cambiarla.
Abbiamo fatto qualcosa che farà urlare alcune persone tra il pubblico.
Ma abbiamo ordinato la corsa per temperatura.
E per saggi.
Lasciami solo
aggiungi un po 'di colore su di esso per avere una visione migliore.
Colore di valore.
Questo è quello che abbiamo fatto.
Abbiamo test che sono in blocco con 90
quindi il blocco 60 e il blocco 30 e in ogni blocco di analisi
abbiamo la temperatura che ha ordinato 40, 30, 20 ecc.
Abbiamo eseguito questo DoE in questo modo.
Ecco i dati che otteniamo.
Noi possiamo
analizzarlo utilizzando la piattaforma del modello fit con i quattro
fattori e esamineremo le perdite e correremo.
Abbiamo un buon modello per le perdite.
Va bene, abbiamo un buon PValue, lo abbiamo
parametri. Va bene.
Ma il fatto è
siamo rimasti piuttosto delusi
dall'approccio statistico perché sappiamo che il primo
la regola è randomizzare la corsa per avere una buona stima dell'errore.
Non è stato soddisfacente.
Siamo tornati ai nostri studi direi e solo come promemoria
lo stato attuale era che non possiamo usare un nuovo batch tra ciascuno.
Sarà richiesto troppo ingombro e non lo abbiamo.
Il dosaggio di massa non può essere modificato tra
ciascuno a causa della rappresentatività della massa e della temperatura non può essere
cambiato facilmente perché sarà davvero molto dispendioso in termini di tempo.
Guardiamo i libri e alla fine molti
libri abbiamo trovato una soluzione che è il design della trama divisa.
Il design della trama divisa è stato introdotto dal campo agricolo perché lo ha fatto
in genere devono cambiare fattore come i campi agricoli.
Diciamo che vuoi studiare
i diversi trattamenti
su cereali o colture diverse e non hai spazio su un campo.
Avremo molti campi e questi campi sono diversi.
Ma questa non è la cosa che vuoi studiare.
L'idea alla base della progettazione della trama divisa è quella di avere un'intera trama che viene riempita
con quello verranno analizzati come blocchi casuali.
E poi su ogni trama intera applicherai un trattamento o una cultura uno, due, tre, quattro
e lo studierai all'interno dell'intera trama e sono chiamati sottotrame.
Come è fatto su JMP.
Lo chiuderò.
Questo.
Questo.
E questo.
Per eseguire una progettazione a trama divisa è necessario passare alla progettazione personalizzata della piattaforma DoE.
Caricherò le risposte per l'esecuzione due.
Aprire.
E i fattori.
Quello che vediamo qui.
Scusa.
Vediamo i nostri quattro fattori di analisi della temperatura,
CFF è il flusso di alimentazione e la pressione.
E abbiamo una colonna aggiuntiva che è il nome cambia.
E puoi sintonizzare il fatto se è difficile,
molto difficile da cambiare o facile da cambiare.
Molto difficile cambiare è la concentrazione o il dosaggio.
Il fattore difficile da cambiare è la temperatura perché possiamo cambiarla
ma non entriamo nel blocco di analisi.
E i fattori facili
sono gli altri due fattori che possono essere randomizzati tra le corse.
Vogliamo andare per il modello di risposta di superficie.
Fai clic su RSM qui mettiamo sei appezzamenti interi e 12 appezzamenti interi.
Abbiamo 36 piste e realizziamo il design.
Ci vorranno alcuni secondi per realizzare il design.
Solo per ricordartelo per il Box-Behnken DoE.
Erano 27 corse.
Abbiamo molte più corse su questo DoE.
Farò la tavola e come per il Box-Behnken aggiungerò dei colori.
Colonna.
Cosa ho fatto. Scusa, ho rifatto il tavolo.
Sì.
Ok scusa. Sì.
Bene.
Vedete che abbiamo test che sono
disponendo i blocchi e corrisponde ai blocchi interi uno, due, tre, quattro
ecc e in ciascuno
blocco del test hai blocchi di temperatura che sono le sottotrame
uno, due, tre, quattro ecc.
E CFF e TMP sono randomizzati all'interno di quei due blocchi.
Eseguiamo questi dati DOE e puoi scegliere il modello.
Qui vediamo le differenze tra l'analisi tra standard
Box-Behnken DoE e design a trama divisa.
Abbiamo tutte le trame che vengono aggiunte
negli effetti e sono trattati come blocchi casuali e abbiamo tutti gli altri
parametri ed effetti.
E qui abbiamo il metodo che è il metodo di analisi REML.
Corriamo
il DoE.
Se ci concentriamo sulla risposta delle perdite, vediamo che abbiamo
un ottimo modello con il 96 percento della variazione spiegata da questo modello.
Vediamo che abbiamo
effetti significativi.
e
il riquadro aggiuntivo che dobbiamo esaminare con questa analisi è la varianza REML
stime dei componenti che ci daranno un'idea del conto introdotto
dai blocchi, l'intera trama e vediamo che il valore PV non è significativo.
Possiamo andare oltre.
Non ci sono problemi con i blocchi così tali
come altri DOE
eseguendo JMP possiamo andare
e avere un profilo da ottimizzare per definire le gamme e lo spazio di progettazione.
Qui lo vediamo
il test è il fattore più colpito
su ogni risposta e perdita è la risposta che è influenzata da tutti
i quattro parametri dei fattori e possiamo vedere
che con i parametri che utilizziamo come target siamo abbastanza bravi con l'ottimizzazione.
Ciò che potrebbe essere interessante è guardare questo modello, questo DoE usando uno standard
analisi.
rimuovo tutto.
Prenderò i quattro
fattore.
Tutto questo.
Per analisi standard.
Lo eseguo.
Qui.
Torno sotto le perdite e la risposta.
Bene.
Qui guarderò
le perdite.
Cosa possiamo vedere
è che non abbiamo lo stesso identico ordine
per i parametri, effetto o stima.
Nell'analisi standard possiamo dire che il dosaggio è il fattore più impattante
mentre nel disegno spettrale è il flusso, il test è il quinto
ed è abbastanza normale
perché quando usiamo i blocchi e facciamo l'analisi standard daremo di più
forza a questi blocchi e faremo errori su di esso
e lo definiremo impattante ma non lo è.
Questo è perfettamente normale.
Questo è il motivo per cui devi farlo
un'analisi che utilizza REML e blocchi per avere il giusto ordine del fattore di impatto.
In conclusione di questo studio.
In questo caso di studio è consentito il disegno a trama divisa
continuare indipendentemente dalla non randomizzazione di alcuni parametri.
Siamo stati in grado di eseguire in un arco di tempo più breve l'intero DoE.
Anche se ha richiesto 36 corse contro 27.
Ma poiché non abbiamo bisogno di concentrarci
per stabilizzare il plotter tra ogni corsa era molto più breve.
E saremo in grado di giustificare adeguatamente
lo spazio progettuale con forti evidenze statistiche.
Vale la pena notare che il design della trama divisa
la piattaforma è ora implementata per sviluppare e ottimizzare rapidamente la nostra proprietà
purificazioni degli eccipienti e come messaggi da asporto.
Fai solo attenzione alla randomizzazione dei fattori.
Sappiamo che è la prima regola per eseguire un DOE, ma è molto importante averne una corretta
design che ti permetterà di avere una statistica
conoscenza del tuo processo e una corretta
il design potrebbe consentire di risparmiare tempo anche se sono necessarie più corse.
Grazie per l'attenzione.
